2016 Fiscal Year Annual Research Report
Retroviral Replicating Vector (RRV)- Mediated Prodrug-Activator Gene Therapy for Pancreatic Cancer
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26461936
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
平岡 圭 北海道大学, 医学研究科, 客員研究員 (10719587)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平野 聡 北海道大学, 医学研究科, 教授 (50322813)
土川 貴裕 北海道大学, 大学病院, 講師 (50507572)
七戸 俊明 北海道大学, 医学研究科, 准教授 (70374353)
中村 透 北海道大学, 医学研究科, 助教 (70645796)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | レトロウイルス / プロドラッグ / 膵癌 / 遺伝子治療 / ウイルスベクター |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、標的腫瘍細胞内で酵母由来シトシンデアミナーゼ酵素（yCD）を発現させることで抗真菌薬であるフルシトシン（5FC）を抗癌剤であるフルオロウラシル（5FU）に変換して抗腫瘍効果を得るプロドラッグシステムと増殖型レトロウイルスベクター（RRV）による遺伝子発現システムを組み合わせた膵癌における新規治療法の確立を目指している。初年度は、RRVを用いた実験に必要となる各種認可を取得し、本研究に使用する高力価RRVウイルスとRRV産生用プラスミドを米国の共同研究施設より入手した。まず，ヒトおよびマウス膵癌細胞株を用いた細胞実験系において、フローサイトメトリーおよびゲノム定量PCRを用いて，その高い感染効率と速やかな増殖能を確認することができた。また、治療ベクターであるyCD遺伝子を有するRRVを感染させたヒトおよびマウス膵癌培養細胞株では、プロドラッグである5FCを投与により強力な殺細胞効果を確認することができた。次に，膵癌細胞株によるマウス皮下移植モデルを作製し、RRVの感染効率と増殖能の検討を行った。摘出した皮下腫瘍をフローサイトメトリーにより計測したところ，初期には約1％であった導入効率が１週間で50％を超える高さまで速やかに増加した。さらに、RRVを感染させたマウス皮下腫瘍移植モデルに対する5FC腹腔内投与では，治療群でコントロール群に比較して有意に皮下腫瘍径の縮小が認められ、ほとんどの腫瘍はほぼ完全消失を示した。また，膵癌同所移植モデルでも，IVIS生体イメージングシステムを用いて5FC投与によるRRV感染腫瘍の縮小効果を確認した。安全性試験としては，ゲノム定量PCRを用いてRRVのバイオディストリビューション解析を行った。以上の前臨床研究において本治療システムの治療効果と安全性を確認できたので、今後は国内臨床試験に向けて環境を整える。
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