バイオマーカーによる胃癌化学療法の効果予測―SPARCの発現および多型による検討

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26461979
• Research Institution: Yamaguchi University
• Principal Investigator: 吉野 茂文 山口大学, 医学部附属病院, 准教授 (60294633)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 坂本 和彦 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50420526)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 胃癌 / 化学療法 / nab-paclitaxel / SPARC / バイオマーカー

Outline of Annual Research Achievements

まず胃癌におけるSPARCの免疫組織染色を行い、胃癌組織でのSPARC発現につき検討した。抗体はSPARCモノクローナル抗体（AON-5031、Santa Cruz社）を用い、濃度を1000倍、インキュベーションを24℃、60分と条件設定した。根治手術を施行した117例の胃癌組織を染色し、全例でSPARCの発現は胃癌周囲の線維芽細胞に見られ胃癌組織には発現していないことが判明した。その中で70例がSPARC発現陽性で、47例が陰性であった。SPARC発現と年齢、性別、組織型、深達度、リンパ節転移、TNMステージ、脈管侵襲、リンパ管侵襲との間に明らかな関係はなかった。予後との関係は、SPARC発現陽性例で全生存期間、無再発生存期間ともに良好であった。その中でも術後に補助化学療法（S-1など）を施行した症例ではSPARC発現陽性例で予後良好であったが、補助化学療法を施行していない症例では予後に有意差を認めなかった。SPARC発現陽性例における良好な予後は、抗がん剤感受性が関与している可能性が示唆された。
一方、現在進行・再発胃癌に対するnab-paclitaxel投与の第II相臨床試験を実施しており、nab-paclitaxelの効果とSPARC発現の関係につき検討する。進行・再発胃癌を対象にS-1投与後の2次化学療法としてnab-paclitaxelを投与する。閾値奏功割合を10%、期待奏功割合を23%と仮定し、α=0.05、β=0.2として必要症例数が43例である。nab-paclitaxelは3週間に1回、180mg/m2の量で投与しこれを1コースとして継続する。臨床効果は、RECISTによる腫瘍縮小効果と全生存期間、無増悪生存期間により評価する。生検により得られた胃癌組織を用いて根治手術症例におけるSPARC染色の条件を用いて、SPARCの免疫組織染色を行う。現在までに15例が第II相臨床試験に登録されており、これらの症例の胃癌組織がストックしてある。今後さらに症例を増やして登録し、nab-paclitaxelの効果とSPARC発現の関係につき検討する予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

まずSPARC染色の条件設定を行い、抗体はSPARCモノクローナル抗体（AON-5031、Santa Cruz社）を用い、濃度を1000倍、インキュベーションを24℃、60分の設定で良好に染色されることが分かった。しかもこの条件では胃癌組織では全く染色されず、胃癌周囲の線維芽細胞にのみ染色されることが判明した。従来の報告では胃癌組織も染色されるとするものも多く、今回新たな知見が得られた。SPARC発現陽性例で全生存期間、無再発生存期間ともに良好で、SPARC発現陽性例における良好な予後は、抗がん剤感受性が関与している可能性が示唆され、これらも今までに報告のない新たな知見である。この条件でSPARC染色を行い、今後進行・再発胃癌に対するSPARCの発現とnab-paclitaxelの効果につき検討する。

Strategy for Future Research Activity

進行・再発胃癌に対するnab-paclitaxel投与の第II相臨床試験を継続し、さらに症例を増やして登録し、nab-paclitaxelの効果とSPARC発現の関係につき検討する。
また、第II相臨床試験に登録した患者末梢血よりDNAを抽出し、SPARCの遺伝子多型をTetra-primer amplification refractory mutation system (ARMS)-PCR法および直接シークエンス法により解析する。SPARCの遺伝子多型は、rs1049539 (Exon 1, G/A allele)、rs1049544 (Exon 4, G/C allele)、rs1130643 (Exon 5, G/A allele)につき解析する。

Causes of Carryover

前年度購入した抗体が余っており抗体購入が不要となったため。

Expenditure Plan for Carryover Budget

抗体購入費用。