2016 Fiscal Year Annual Research Report
Function analysis of exosome derived from hepatocellular carcinoma cells under hypoxia for tumor angiogenesis, invasion and metastasis
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26462043
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
和田 浩志 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (00572554)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
永野 浩昭 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10294050)
小林 省吾 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪国際がんセンター(研究所), その他部局等, 副部長 (30452436)
富丸 慶人 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (70528570) [Withdrawn]
江口 英利 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (90542118)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 肝細胞癌 / 血管新生 / エクソソーム / マイクロRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
肝細胞癌の浸潤・転移機構を解明するために、肝癌細胞から分泌されるエクソソーム（肝癌由来エクソソーム）の腫瘍増殖および血管新生への影響について検討した。
ヒト肝癌細胞株（HuH7、PLC/PRF/5）を通常酸素下および低酸素下で培養し、細胞増殖と分泌されるエクソソーム量を比較すると、低酸素培養下では、いずれの細胞株も増殖能が低下したが、細胞1個当たりから分泌されるエクソソーム量は増加した。次に、抽出したエクソソームをヒト血管内皮細胞（HUVECs）に添加したところ、対照群と比較し増殖能は抑制されたが、Tube formation assayでは低酸素下エクソソーム添加により1視野あたりのbranch point(分枝細胞数)が有意に増加した(p<0.05)。
肝細胞癌において血管新生、腫瘍進展に関連するmicroRNA発現をqPCR法にて検討すると、低酸素培養下の肝癌細胞ではmiR-155の発現が有意に上昇していた(HuH7:3.5倍、PLC:3.1倍)。またエクソソーム内miRNAも同様に有意に上昇していた(HuH7:1.5倍、PLC:3.3倍)。anti-miR155を導入した低酸素下の肝癌細胞株からエクソソームを抽出しHUVECに添加すると、mockのエクソソーム添加と比較して、anti-miR155を導入したエクソソーム添加では脈管形成能が抑制された。
肝細胞癌切除例29症例の術前血清を用いて、血清中エクソソーム内miR-155の発現を定量し予後との相関を解析すると、中央値でHigh群/ Low群の2群に分類すると、miR-155 High群の無再発生存率は有意に不良であった。
低酸素環境下での肝癌細胞由来のエクソソームは血管新生促進作用を有しており、特にエクソソーム内のmiR-155が血管新生能に関与しており、治療標的となり得る可能性が示唆された。
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