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2015 Fiscal Year Research-status Report

EGFRカスケードと5-FU代謝酵素のクロストーク解明による肺癌治療の個別化戦略

Research Project

Project/Area Number 26462130
Research InstitutionNagasaki University

Principal Investigator

永安 武  長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (80284686)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 土谷 智史  長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 准教授 (30437884)
日高 重和  長崎大学, 病院(医学系), 准教授 (30380885)
Project Period (FY) 2014-04-01 – 2017-03-31
KeywordsDPD / EGFR / Sp1 / Gefitinib / NSCLC
Outline of Annual Research Achievements

①EGFR-Sp1-DPDというカスケードが成立するかどうか、肺がん細胞株で検討した。PC9(EGFR exon19 mut)にEGFを投与すると濃度依存性にDPD/Sp1のRNA, タンパクの発現が増加した。また、Inhibitor(Gefitinib, Mithramycin; Sp1 inhibitor)を投与するとEGFR下流の因子およびSp1/DPDの発現が抑制された。これよりEGFR-Sp1-DPDのカスケードは存在するものと考えた。
②EGFRの変異の有無と上記カスケードの関係につき様々な肺癌細胞株を用いて検討した。使用した肺癌細胞株はEGFR wild type(H1299, H1437)およびEGFR mutant type(PC9, HCC827, H1975;T790M)。各細胞株においてbaselineのSp1/DPD発現をmRNA・タンパクレベルで確認したところ変異株において有意にDPD/Sp1の発現の上昇を認めた。Inhibitor投与においても変異株において著明にSp1/DPDの発現低下を認めた。
③過去の報告から、EGFR変異を有するものは有しないものと比較し5-FU系抗がん剤の効果が乏しいとされてきた。今回WST-1 assayで5-FU+Inhibitor投与での各細胞のcell viabilityを確認した。すると変異株において有意に変異株のcell viabilityの低下がみられた。これはInhibitor投与によりDPD発現が抑制され5-FUの感受性が増加したものと考えられた。
④またsiRNAを用いてPC9細胞のSp1抑制を行ったところ、DPDのタンパク発現が抑制された

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本年度は、実験の精度を上げるため細胞株の追加を行い同様の結果が得られた。
また、siRNAを用いることによりカスケードの詳細を検討できた。
論文投稿中である

Strategy for Future Research Activity

マウスを用いて1か月Gefitinibを投与しコントロールと比較しDPDの発現に差が出るかどうか検討する。

Causes of Carryover

今年度は細胞株実験の継続であったため、新たな細胞株購入がいらなかった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

次年度はマウスなど動物実験を行う予定であり、薬剤量も増加するため適正な科研費使用を行うよう計画を立てる

  • Research Products

    (1 results)

All 2015

All Presentation (1 results)

  • [Presentation] 非小細胞肺癌にpけるEGR変異とDPDおよびその関連因子に関する検討2015

    • Author(s)
      富永哲郎,土谷智史,朝重耕一,畑地 豪,荒井淳一,宮﨑拓郎,松本桂太郎,山崎直哉,永安 武
    • Organizer
      日本臨床分子形態学会
    • Place of Presentation
      長崎大学(長崎県長崎市)
    • Year and Date
      2015-09-19 – 2015-09-19

URL: 

Published: 2017-01-06  

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