The cytostatic effects of zoledronic acid on ACC-MESO-1 cells

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26462148
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 朝倉 啓介 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 共同研究員 (90383786)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 河野 光智 東海大学, 医学部, 准教授 (10276272) ; 大塚 崇 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 准教授 (40306717) ; 涌井 昌俊 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (90240465)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 悪性胸膜中皮腫 / ビスフォスフォネート / ゾレドロン酸 / オートファジー

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は悪性胸膜中皮腫に対するゾレドロン酸の抗腫瘍効果とその機序を明らかにし、臨床応用することである。平成26年度は細胞実験を中心に、ゾレドロン酸の抗腫瘍効果を検討した。【ゾレドロン酸の殺細胞効果　MTTアッセイ】ゾレドロン酸20～100μMの投与により、ヒト悪性胸膜中皮腫細胞株ACC-MESO-1細胞のcell viabilityは10～40%低下した。【ゾレドロン酸の細胞遊走抑制効果　Wound healing assay】ゾレドロン酸20～100μM投与により、ACC-MESO-1細胞の遊走能は10～40%低下した。平成27年度はその作用機序を検討した。【ゾレドロン酸によるアポトーシス誘導　①Appopercentage kit assay　②caspase-3ウェスタンブロット】アポトーシス誘導細胞のみを選択的に染色する色素（Appopercentage kit）およびアポトーシスマーカーであるcaspase-3のウェスタンブロットを用いて、ゾレドロン酸20～100μMを48時間投与したACC-MESO-1細胞にアポトーシスが誘導されるかを検討した。いずれの濃度でもアポトーシス誘導は認めなかった。平成28年度も作用機序の検討を継続した。【ゾレドロン酸によるオートファジー誘導】アポトーシスマーカーであるLC3Bのウェスタンブロットを行ったところ、ゾレドロン酸20～100μM投与したACC-MESO-1細胞でLC3B発現が増加しており、ゾレドロン酸によるオートファジー誘導を認めた。またオートファジー阻害薬である3メチルアデニンを同時投与したところ、ゾレドロン酸によるcell viablityの低下は部分的にレスキューされた。以上より、ゾレドロン酸のACC-MESO-1細胞に対する抗腫瘍効果には部分的にオートファジーが関与しているものと考えられた。