2014 Fiscal Year Research-status Report
iPS細胞移植による機能的神経回路網再建および悪性脳腫瘍治療法に関する基礎的研究
| Project/Area Number |
26462171
|
|---|
| Research Institution | Keio University |
|---|
Principal Investigator |
峯 裕 慶應義塾大学, 医学部, 訪問研究員 (10306730)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井上 賢 慶應義塾大学, 医学部, 研究員 (70445378)
戸田 正博 慶應義塾大学, 医学部, 准教授 (20217508)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | iPS細胞 / 脳梗塞 / 神経移植 / 再生医療 / 悪性脳腫瘍 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の最終目標はヒト幹細胞を用いた①脳血管障害に対する再生医療の確立と②悪性脳腫瘍治療法の開発である。臨床応用への実現性を考慮し、移植細胞（ドナー細胞）としてヒトiPS細胞およびiPS 細胞由来神経幹細胞を用いた実験などで下記の成果を得た。
①移植手技の確立を目的に、予備実験としてラット胎生10.5日(E10.5)胎仔より神経上皮型幹細胞を採取し、既報の方法(Mine et al.: Neurosurgery 64: 741-753, 2009; Neurobiol Dis 52: 191-203, 2013)に基づき正常ラット線条体に定位的に移植した。移植した全個体で移植神経上皮型幹細胞は生着し、神経細胞への分化傾向を示した。片側中大脳動脈閉塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)モデル作成および行動学的評価法(stepping test、cylinder test、stair case test 等)は安定して作成が可能となった。
次いでヒトiPS細胞の移植を計画した。しかし、iPS細胞は腫瘍化傾向があるため神経上皮型幹細胞へ分化させて移植細胞として用いる事にした。現在、既報(Oki et al.: Stem Cells 30: 1120-1133, 2012; Falk et al.: PLoS One 7:e29597)などに準じて、安定・効率的な神経上皮型幹細胞への分化方法を試行している。また移植時の免疫抑制法やヌードラットでの脳梗塞モデル作成を検討している。
②マウス線条体内にマウス脳腫瘍幹細胞を移植し脳腫瘍モデルを作成した。移植した全個体で腫瘍細胞の生着を認め、移植後4－5週間で腫瘍増大により動物は死亡した。以上より、安定したマウス悪性脳腫瘍モデル作成を確立した。今後、神経幹細胞移植を行っていく予定である。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
神経移植法、脳梗塞モデル（中大脳動脈閉塞モデル）、悪性脳腫瘍モデルに関しては安定したモデル動物作成が可能となり、その行動学的評価方法も確立された。しかし、治療用移植細胞の選定と安定した細胞確保が確立されておらず、本格的な細胞移植による治療効果の検討に入っていないため。
|
| Strategy for Future Research Activity |
移植ドナー細胞（治療用移植細胞）として考えているiPS細胞由来神経上皮型幹細胞の安定した分化・培養系の確立が急務である。同時に移植後の安全性も検討が必要で有り、早期の正常動物への移植を開始する。また平行して、脳梗塞モデル動物および悪性脳腫瘍モデル動物の作成も行い、移植細胞による疾患への影響を検証する。
|
| Causes of Carryover |
移植細胞の安定した分化・培養系が確立されておらず、移植実験計画が予定通りに進まなかったため、次年度使用額として計上した。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度において移植実験を行って行く予定であり、実験動物購入や飼育費に充当する予定である。
|
