2015 Fiscal Year Research-status Report
慢性硬膜下血腫被膜の自然退縮におけるapoptosisの役割
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26462174
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| Research Institution | Aichi Medical University |
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Principal Investigator |
大須賀 浩二 愛知医科大学, 医学部, 教授 (40378013)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
渡辺 泰男 昭和薬科大学, 薬学部, 教授 (10273228)
高安 正和 愛知医科大学, 医学部, 教授 (60216794)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 慢性硬膜下血腫 / apoptosis |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度に引き続き、高齢者の軽微な頭部外傷後に発生する慢性硬膜下血腫術後において、被膜の自然退縮による治癒に至るメカニズムを解明するために本研究を続行してきた。術中に採取された慢性硬膜下血腫被膜を用いてWestern blotにて、apoptosisと関連が示唆されているCaspase signaling, Autophagy signalingやNF-kB signalingについて検討を加えた。
まず、Caspase signalingにおいては、Caspase3, Cleaved Caspase-3, PARPなどの発現を認め、免疫染色においては、血管内皮やfibroblastにおいて発現が認められた。すなわち慢性硬膜下血腫被膜においてapoptosisがおこっており被膜の増大ならびに縮小に関与している可能性が示唆された。
NF-kB signalingにおいては、IKKbeta, IKKgamma, IkappaBalpha, NF-kBなどの発現が確認されたが、免疫染色では被膜の血管内皮において発現を確認した。また、マウス脳血管内皮培養細胞を用いて慢性硬膜下血腫内溶液を添加することによりNF-kBの活性化が確認され、VEGF inhibitorによりNF-kBの活性化が抑制されることが確認できた。これすなわちVEGFからNF-kBのシグナル伝達系の活性化が引き起こされ、被膜の増大に関与していることが判明した。
Autophagy signalingにおいては、beclin, Atg3, 7, 12, LC 3A/Bの発現をWestern blotにて認め、免疫染色ではこれらの発現はfibroblastにおいて認められた。
以上のように、これらのシグナル伝達系が深く慢性硬膜下血腫被膜術後の自然退縮に深く関与している可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究実績において記載させていただいたように、apoptosisと関連の深いシグナル伝達系蛋白の発現をWestern blotならびに免疫染色において、新たな結果を得ることができ、おおむね順調に進展していると判断します。
研究実績の概要では記載できませんでしたが、慢性硬膜下血腫被膜の血管内皮においてSTAT3の活性化の確認をWestern blotならびに免疫染色において確認し、ラット脳血管内皮培養細胞を用いて血腫内容溶液中のinterleukin-6によってSTAT3の活性化が引き起こされ血管新生に深く関与していることをWorld Neurosurgeryにおいて発表できました(in press)。
今後も引き続き検索範囲をひろげ、十分に検討を加えていきたいと思っています。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後の研究の推進方策としては、apoptosisと関連が深いBCL family signalingに関しても、Western blotならびに免疫染色にて検討を加える予定です。
また、術中ならびに術翌日に採取された慢性硬膜下血腫内溶液をもちいて、質量分析器にて新たに産生された蛋白質を探索し、血腫被膜の再発ならびに退縮への因果関係について検討する。
血管内皮ならびにfibroblastの培養細胞をもちいて、血腫内容液を添加しあらたなるシグナル伝達系の活性化の有無につき検討を加える予定です。
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| Causes of Carryover |
今まで検討してきたCaspase, AutophagyならびにNF-kBなどのシグナル伝達系に関しては、結果が出る可能性が高い抗体を必要最小限の購入に心がけてきました。よって、BCL familyシグナル伝達系に関しては施行しておらず、それに伴う抗体や試薬など未購入のため次年度使用額が生じました。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
今までの結果から有意な結果が得られたシグナル伝達系に関しては、その近傍のシグナル伝達系に関して網羅的に検討を行っていく予定で、それに伴う抗体や試薬の購入を予定しています。
慢性硬膜下血腫の術前後におけるあらたな発現蛋白の質量分析器をもちいて検討においては、様々な試薬の購入が必要となり、そちらにもあてていく予定です。
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[Journal Article] Diagnostic accuracy of multifidus muscle spontaneous activity by needle electromyography for the detection of lumbar foraminal and lateral exit-zone stenosis.2015
Author(s)
Takeuchi M, Wakao N, Kamiya M, Gosho M, Osuka K, Hirasawa A, Niwa A, Aoyama M, Kawaguchi R, Shima H, Takayasu M
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Journal Title
Eur Spine J
Volume: 24
Pages: 2281-2287
DOI
Peer Reviewed
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