悪性グリオーマ幹細胞におけるWT1とALCAMの機能的役割と血管新生への関与

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26462180
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 橋本 直哉 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90315945)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 坪井 昭博 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10372608) ; 千葉 泰良 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任研究員 (90533795) ; 永野 大輔 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (70726520) ; 高野 浩司 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (90649203) ; 福屋 章悟 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (50726502)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: WT1 / ALCAM/sALCAM / 腫瘍血管新生能 / 腫瘍形成能

Outline of Annual Research Achievements

我々は過去にグリオーマ細胞の発生、増殖に重要と考えられる2つの遺伝子／分子を同定し、それらは腫瘍の血管新生に深く関与することを見いだした。それらWT1遺伝子産物とALCAM(Activated leukocyte cell adhesion molecule)分子を基軸として、悪性グリオーマ幹細胞やグリオーマ細胞における機能的役割と血管新生への関与の仕組みを解明することにより、新たな悪性グリオーマ幹細胞を標的とした治療法を開発することを目的に、研究計画書に基づき、以下3つの研究を開始し一定の成果を得た。
A: 悪性グリオーマ幹細胞におけるWT1遺伝子産物の機能的役割の検討：臨床検体を用いて、Tumor sphereを形成する初期培養腫瘍細胞にてWT1をknock downし、in vitroでの分化能の相違を検討し、一定の結果を得た。またそれらを免疫不全マウスに移植し、腫瘍形成能を評価し始めた。
B: 悪性グリオーマ血管新生におけるWT1とALCAM / sALCAMの機能的役割の解明：In vitroにおけるtube formation assay、in vivoでの腫瘍血管内皮細胞の相違を検討した。ALCAM (sALCAM)とWT1は腫瘍血管新生に重要な役割を担っていることは示唆された。
C: 悪性グリオーマ幹細胞のperivascular nicheにおけるALCAM (sALCAM)とWT1の機能的役割の解明: CD133(+)ALCAM(+)WT1(+)とWT1(－)の腫瘍細胞を、血管内皮細胞と共培養し、血管内皮細胞のtube formationの違いを検討した。結果の解析中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

A: 悪性グリオーマ幹細胞におけるWT1遺伝子産物の機能的役割の検討、B: 悪性グリオーマ血管新生におけるWT1とALCAM / sALCAMの機能的役割の解明、C: 悪性グリオーマ幹細胞のperivascular nicheにおけるALCAM (sALCAM)とWT1の機能的役割の解明のそれぞれにおいて、一定の成果を得た。また、B: 悪性グリオーマ血管新生におけるWT1とALCAM / sALCAMの機能的役割の解明では、ALCAM (sALCAM)とWT1は腫瘍血管新生に重要な役割を担っていることが示唆されており、今後の研究の方向性も変更せずに遂行できる。

Strategy for Future Research Activity

平成27年度は研究成果に記したA, B, Cの研究を研究計画書通りに遂行するとともにDを開始する予定である。
A: 悪性グリオーマ幹細胞におけるWT1遺伝子産物の機能的役割の検討：Tumor sphereを形成する初期培養腫瘍細胞を免疫不全マウスに移植し、腫瘍形成能を評価し始めており、腫瘍形成能や生存に関するデータ収集を行う。
B: 悪性グリオーマ血管新生におけるWT1とALCAM / sALCAMの機能的役割の解明：ALCAM (sALCAM)とWT1は腫瘍血管新生に重要な役割を担っていることは示唆されており、実験の再試行などによりデータをconfirmする。
C: 悪性グリオーマ幹細胞のperivascular nicheにおけるALCAM (sALCAM)とWT1の機能的役割の解明：血管内皮細胞のWT1およびALCAM knock down細胞を腫瘍細胞と共培養し、tumor sphere形成能と分化能に違いを明らかにし、perivascular nicheにおける血管内皮細胞と幹細胞のクロストーク、幹細胞の維持に果たす役割を検討し始める。
研究計画書のD: sALCAMに対するblocking antibodyの作成とその効果の検討、を開始し、sALCAMのblocking antibodyを作成し、本分子が治療の標的になる可能性について検討を始める。
A-Dの結果を共同研究者と共有し、全体としての研究報告に向かい、総括的な解析／検討を開始する。

Causes of Carryover

平成26年度はA: 悪性グリオーマ幹細胞におけるWT1遺伝子産物の機能的役割の検討、B: 悪性グリオーマ血管新生におけるWT1とALCAM / sALCAMの機能的役割の解明、C: 悪性グリオーマ幹細胞のperivascular nicheにおけるALCAM (sALCAM)とWT1の機能的役割の解明、の３つの研究を同時並行的に進めており、それぞれの実験過程で、進行状況に若干の差異が生じた。さらにこれらA, B, Cは平成27年度も継続して行うため、その継続性を重視し、若干の残額が生じることとなった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

研究計画書のA, B, Cの中では、C: 悪性グリオーマ幹細胞のperivascular nicheにおけるALCAM (sALCAM)とWT1の機能的役割の解明、がA, Bに比して遅れているため、継続するCの研究経費として使用する計画である。

Remarks

大阪大学研究者総覧
http://www.dma.jim.osaka-u.ac.jp/view?l=ja&u=2168

Research Products

• [Journal Article] Wilms tumor 1-peptide vaccination combined with temozolomide against newly diagnosed glioblastoma: safety and impact on immunological response (2015)
  • Author(s): Naoya Hashimoto, Akihiro Tsuboi, Naoki Kagawa, Yasuyoshi Chiba, Shuichi Izumoto, Manabu Kinoshita, Noriyuki Kijima, Yoshihiro Oka, Soyoko Morimoto, Hiroko Nakajima, Satoshi Morita, Junichi Sakamoto, Sumiyuki Nishida, Naoki Hosen, Yusuke Oji, Norio Arita, Toshiki Yoshimine, Haruo Sugiyama
  • Journal Title: Cancer Immunol Immunother. Volume: - Pages: in press
  • DOI: 10.1007/s00262-015-1674-8
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] IDH1/2 mutation detection in gliomas. (2015)
  • Author(s): Arita H, Narita Y, Yoshida A, Hashimoto N, Yoshimine T, Ichimura K.
  • Journal Title: Brain Tumor Pathol Volume: - Pages: in press
  • DOI: 10.1007/s10014-014-0197-x
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Wilm’s Tumor 1 Is Involved in Tumorigenicity of Glioblastoma by Regulating Cell Proliferatuin and Apoptosis. (2014)
  • Author(s): Kijima N, Hosen N, Kagawa N, Hashimoto N, Kinoshita M, Oji Y, Sugiyama H, Yoshimine T.
  • Journal Title: ANTICANCER RESEARCH Volume: 34 Pages: 61-67
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Different spatial distribution between germinal center B and non-germinal center B primary central nervous system lymphoma revealed by magnetic resonance group analysis. (2014)
  • Author(s): Kinoshita M, Sasayama T, Narita Y, Yamashita F, Kawaguchi A, Chiba Y, Kagawa N, Tanaka K, Kohmura E, Arita H, Okita Y, Ohno M, Miyakita Y, Shibui S, Hashimoto N, Yoshimine T.
  • Journal Title: Neuro Oncol. Volume: 16 Pages: 728-734
  • DOI: 10.1093/neuonc/not319
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] 悪性神経膠腫に対するテモゾロミド併用のWT１ペプチド免疫療法とimmuno RANO (2015)
  • Author(s): 橋本直哉、坪井昭博、香川尚己、有田英之、尾路祐介、岡芳弘、吉峰俊樹、杉山治夫
  • Organizer: 第18回WT1ペプチド癌免疫療法研究
  • Place of Presentation: 大阪大学医学部（大阪府吹田市）
  • Year and Date: 2015-03-31
• [Presentation] 悪性神経膠腫を対象としたWT１キラーペプチドとＷＴ１ヘルパーペプチドを併用したペプチド免疫療法 (2015)
  • Author(s): 坪井昭博、橋本 直哉、香川尚己、西田 純幸,森本 創世子、藤木 文博、中島 博子、吉峰俊樹、岡 芳弘、杉山治夫
  • Organizer: 第18回WT1ペプチド癌免疫療法研究
  • Place of Presentation: 大阪大学医学部（大阪府吹田市）
  • Year and Date: 2015-03-31
• [Presentation] WT1ペプチドワクチンの治療反応性予測マーカー：WT1ペプチド抗体 (2015)
  • Author(s): 尾路祐介、橋本直哉、坪井昭博、村上由依、岩井美樹、岡芳弘、杉山治夫
  • Organizer: 第18回WT1ペプチド癌免疫療法研究
  • Place of Presentation: 大阪大学医学部（大阪府吹田市）
  • Year and Date: 2015-03-31
• [Presentation] 脳腫瘍画像の基本とそこから見えるもの (2015)
  • Author(s): 橋本直哉
  • Organizer: 診療放射線技師画像解析セミナー(HITの会)
  • Place of Presentation: (株)島津製作所 関西支社（大阪市北区）
  • Year and Date: 2015-02-28
  • Invited
• [Presentation] 膠芽腫手術におけるナビゲーションと5-ALAの摘出率への寄与について (2015)
  • Author(s): 橋本直哉、永野大輔、福屋章悟、高野浩司、平山龍一、有田英之、香川尚己、吉峰俊樹
  • Organizer: 第38回日本脳神経CI学会
  • Place of Presentation: ウインクあいち（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2015-02-15
• [Presentation] FDG / Methionine PET の非造影神経膠腫に対するグレード診断能と予後予測能 (2014)
  • Author(s): 高野浩司、木下 学、福屋章悟、永野大輔、平山龍一、有田英之、沖田典子、千葉泰良、香川尚己、埜中正博、畑澤 順、橋本直哉、吉峰俊樹
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍学会学術集会
  • Place of Presentation: シェラトン・グランデ・トーキョーベイ・ホテル（千葉県浦安市）
  • Year and Date: 2014-12-01
• [Presentation] VBM based image analysis による脳腫瘍の網羅的画像解析 (2014)
  • Author(s): 木下学、高野浩司、平山龍一、有田英之、篠山隆司、成田善孝、今村文生、東山聖彦、橋本直哉、吉峰俊樹
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍学会学術集会
  • Place of Presentation: シェラトン・グランデ・トーキョーベイ・ホテル（千葉県浦安市）
  • Year and Date: 2014-12-01
• [Presentation] 国内におけるグリオーマの分子遺伝学的診断の実態について (2014)
  • Author(s): 橋本直哉, 有田英之, 成田善孝, 藤巻高光, 吉峰俊樹.
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍学会学術集会
  • Place of Presentation: シェラトン・グランデ・トーキョーベイ・ホテル（千葉県浦安市）
  • Year and Date: 2014-11-30
• [Presentation] 悪性グリオーマに対するWT1 CTL ペプチドとWT1 ヘルパーペプチドを併用した免疫療法 (2014)
  • Author(s): 橋本直哉, 坪井昭博, 香川尚己, 福屋章悟, 永野大輔, 高野浩司, 平山龍一, 有田英之, 千葉泰良, 木下学, 森本創世子, 岡芳弘, 尾路祐介, 杉山治夫, 吉峰俊樹.
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍学会学術集会
  • Place of Presentation: シェラトン・グランデ・トーキョーベイ・ホテル（千葉県浦安市）
  • Year and Date: 2014-11-30
• [Presentation] テモゾロミドによる潜在性結核感染の再活性化：症例報告と対策 (2014)
  • Author(s): 藤本康倫, 丸草英司, 香川尚己, 千葉泰良, 橋本直哉, 若山暁, 吉峰俊樹.
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍学会学術集会
  • Place of Presentation: シェラトン・グランデ・トーキョーベイ・ホテル（千葉県浦安市）
  • Year and Date: 2014-11-30
• [Presentation] TERT とIDH 遺伝子変異に基づく成人悪性神経膠腫の分子分類 (2014)
  • Author(s): 有田英之、成田善孝、山崎夏雄、松下裕子、清水早紀、白畑充章、武笠晃丈、福島慎太郎、中村大志、中村大志、高見浩数、吉田朗彦、宮北康二、大野誠、田中将太、小林啓一、橋本直哉、吉峰俊樹、川原信隆、斉藤延人、植木敬介、永根基雄、西川亮、渋井壮一郎、市村幸一
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍学会学術集会
  • Place of Presentation: シェラトン・グランデ・トーキョーベイ・ホテル（千葉県浦安市）
  • Year and Date: 2014-11-30
• [Presentation] Comparison of DTI and 11C-methionine PET focusing on their predictive values of tumor cell density in gliomas (2014)
  • Author(s): Manabu Kinoshita, Hideyuki Arita, Naoki Kagawa, Yoshiyuki Watanabe, Jun Hatazawa2, Naoya Hashimoto, Toshiki Yoshimine
  • Organizer: 19th Annual Scientific Meeting and Education Day of the Society for Neuro-Oncology
  • Place of Presentation: Miami, USA
  • Year and Date: 2014-11-15
• [Presentation] 悪性脳腫瘍に対する免疫療法と核医学 (2014)
  • Author(s): 橋本直哉
  • Organizer: 第54回日本核医学会学術総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場（グランキューブ大阪） （大阪市北区）
  • Year and Date: 2014-11-08
• [Presentation] 悪性神経膠腫におけるTERTプロモーター変異と分子分類 (2014)
  • Author(s): 有田英之、成田善孝、福島慎太郎、中村大志、高見浩数、吉田朗彦、宮北康二、大野誠、橋本直哉、吉峰俊樹、川原信隆、渋井壮一郎、市村幸一
  • Organizer: 日本脳神経外科学会 第73回学術総会
  • Place of Presentation: グランドプリンスホテル新高輪（東京都港区）
  • Year and Date: 2014-10-11
• [Presentation] 悪性神経膠腫標準治療のための「標準画像」の探索〜定位サンプリングによる拡散テンソル画像とメチオニンPETの比較から〜 (2014)
  • Author(s): 木下学、有田英之、沖田典子、香川尚己、貴島晴彦、渡邊嘉之、畑澤順、橋本直哉、吉峰俊樹
  • Organizer: 日本脳神経外科学会 第73回学術総会
  • Place of Presentation: グランドプリンスホテル新高輪（東京都港区）
  • Year and Date: 2014-10-11
• [Presentation] 髄芽腫の再発予測と治療戦略における分子亜型分類の意義 (2014)
  • Author(s): 香川 尚己, 平山 龍一, 木嶋 教行, 千葉 泰良, 有田 英之, 木下 学, 高野 浩司,永野 大輔, 福屋 章悟, 山本 福子, 金村 米博, 橋井 佳子, 原 純一, 橋本 直哉,吉峰 俊樹
  • Organizer: 日本脳神経外科学会 第73回学術総会
  • Place of Presentation: グランドプリンスホテル新高輪（東京都港区）
  • Year and Date: 2014-10-10
• [Presentation] 標準治療としてのアミノレブリン酸塩酸塩による術中蛍光診断 (2014)
  • Author(s): 永野大輔、橋本直哉、福屋章悟、高野浩司、平山龍一、有田英之、千葉泰良、木下学、香川尚己、吉峰俊樹
  • Organizer: 日本脳神経外科学会 第73回学術総会
  • Place of Presentation: グランドプリンスホテル新高輪（東京都港区）
  • Year and Date: 2014-10-09
• [Presentation] グリオーマのWT1ペプチドワクチン療法；テモゾロミド併用の効果、バイオマーカーと免疫学的応答 (2014)
  • Author(s): 橋本直哉、香川尚己、千葉泰良、坪井昭博、木下学、岡芳弘、尾路祐介、泉本修一、有田憲生、杉山治夫、吉峰俊樹
  • Organizer: 日本脳神経外科学会 第73回学術総会
  • Place of Presentation: グランドプリンスホテル新高輪（東京都港区）
  • Year and Date: 2014-10-09
• [Presentation] 悪性神経膠腫におけるTERTプロモーター変異の予後マーカーとしての意義 (2014)
  • Author(s): 有田英之、成田善孝、福島慎太郎、中村大志、高見浩数、吉田朗彦、宮北康二、大野誠、橋本直哉、吉峰俊樹、川原信隆、渋井壮一郎、市村幸一
  • Organizer: 第15回日本分子脳神経外科学会
  • Place of Presentation: 大門パルズ（山形県山形市）
  • Year and Date: 2014-09-25
• [Presentation] Navigation systemとアミノレブリン酸塩酸塩の初発膠芽腫における摘出率への影響 (2014)
  • Author(s): 永野大輔、橋本直哉、福屋章悟、高野浩司、平山龍一、有田英之、香川尚己、吉峰俊樹
  • Organizer: 第19回日本脳腫瘍の外科学会
  • Place of Presentation: 東京ドームホテル（東京都文京区）
  • Year and Date: 2014-09-12
• [Presentation] 画像/蛍光誘導手術から見えるもの (2014)
  • Author(s): 橋本直哉
  • Organizer: 第19回日本脳腫瘍の外科学会
  • Place of Presentation: 東京ドームホテル（東京都文京区）
  • Year and Date: 2014-09-12
  • Invited
• [Presentation] 脳腫瘍に対する覚醒下手術の臨床的検討 (2014)
  • Author(s): 福屋章悟、 橋本 直哉、 平山 龍一、永野 大輔、 高野 浩司、有田 英之、後藤 哲、千葉 泰良、木下 学、香川 尚己、貴島 晴彦、平田 雅之、吉峰 俊樹
  • Organizer: 第12回Awake Surgery
  • Place of Presentation: 砂防会館（東京都千代田区）
  • Year and Date: 2014-09-11
• [Presentation] WT1 peptide vaccination for malignant gliomas as a part of multi-modal therapy (2014)
  • Author(s): Naoya Hashimoto, Akihiro Tuboi, Yasuyoshi Chiba, Ryuichi Hirayama, Koji Takano, Noriyuki Kijima, Yoshihiro Oka, Naoki Kagawa, Shuichi Izumoto, Haruo Sugiyama, Toshiki Yoshimine
  • Organizer: ICBTRT2014_20th International Conference on Brain Tumor Research and Therapy
  • Place of Presentation: California, USA
  • Year and Date: 2014-07-22
• [Presentation] 膠芽腫におけるアミノレブリン酸塩酸塩を用いた術中蛍光診断と摘出率 (2014)
  • Author(s): 永野大輔、橋本直哉、福屋章悟、高野浩司、平山龍一、有田英之、香川尚己、吉峰俊樹
  • Organizer: 第10回日本脳神経外科光線力学学会
  • Place of Presentation: アクトシティ浜松 コングレスセンター（静岡県浜松市）
  • Year and Date: 2014-06-28
• [Presentation] Grade III グリオーマにおけるTERT プロモーター変異のバイオマーカーとしての意義の検討 (2014)
  • Author(s): 有田英之、成田善孝、福島慎太郎、中村大志、高見浩数、吉田朗彦、宮北康二、大野誠、川原信隆、 渋井壮一郎、市村幸一
  • Organizer: 第32回日本脳腫瘍病理学会
  • Place of Presentation: あわぎんホール（徳島県徳島市）
  • Year and Date: 2014-05-23
• [Presentation] 悪性脳腫瘍に対する免疫療法の現状と展望 (2014)
  • Author(s): 橋本直哉
  • Organizer: 大分脳腫瘍研究会
  • Place of Presentation: レンブラントホテル大分（大分県大分市）
  • Year and Date: 2014-05-09 – 2014-05-09
  • Invited
• [Presentation] RESPONSEASSESSMENTS IN WT1 PEPTIDE VACCINATION AND LONG TERM RESULTS OF COMOZOLOMIDE THERAPY (2014)
  • Author(s): Naoya Hashimoto,Akihiro Tsuboi,Yasuyoshi Chiba,Yoshihiro Oka,Soyoko Morimoto,Hiroko Nakajima,Sumiyuki Nishida,Naoki Hosen,Naoki Kagawa,Yusuke Oji,Toshiki Yoshimine,Haruo Sugiyama
  • Organizer: The7th International Conference on WT1 in human neoplasia
  • Place of Presentation: Barcelona, Spain
  • Year and Date: 2014-04-23