2016 Fiscal Year Annual Research Report
Promotion of peripheral nerve regeneration targeted neuromuscular junction
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26462230
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
若林 良明 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 非常勤講師 (00431916)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
榎本 光裕 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 講師 (90451971)
早乙女 進一 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 寄附講座准教授 (20401391)
大川 淳 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (30251507)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 神経科学 / 再生科学 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究計画では、末梢神経損傷モデルを使用し、神経筋接合部（NMJ）の変性保護に注目し、神経損傷における神経再生ならびに拘縮予防の新規治療法の開発を目指すものである。
最終年度は、Thy1-YFP遺伝子導入マウスの腓骨神経を結紮、切断したモデルを作製し、切断6週後に近位切断端を展開して野生型allograftで再建した。2週ごとに足底足趾のビデオ撮影を行い、peroneal functional indexを計測した。その結果、再建後6週は移植前と同等の運動機能を維持していたが、8週経過すると再建前より運動機能が悪化した。再建後10週で前脛骨筋を摘出し、凍結切片でNMJをα-bungarotoxin（BTX）で可視化した。YFP陽性線維とBTX陽性が筋内で観察されたが、BTX陽性数は、正常側と比較すると10％程度しか存在していなかった。同結果から神経切断後のBTX数の変化を長期に観察すると損傷6週から8週にかけて急速にBTX数が減少することが明らかとなった。NMJが減少していく状況での神経再建であり、神経再支配を得るためには6週以前での神経再建を考慮する必要を考えた。
切断4週後に同様に野生型allograftで再建した4週群を作製した。6週群と同様に運動機能、組織学的に解析を行った。その結果、運動機能は再建10週で再建前より改善し、最終観察時点でのBTX陽性数は正常側と比較して30％程度存在し、YFP陽性線維が近接し、NMJを形成していた。
本研究で脱神経となった骨格筋内でのアセチルコリン受容体は一定期間維持されているものの6週以前での神経再建がない場合、機能再獲得が不可能となることが明らかとなった。6週以降での神経再支配得るためにはNMJ数の減少を防ぐ手法が必須となる。今後、L型Caチャネル作用薬による神経筋接合部の保護効果を確認し、論文作成を行う予定である。
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