ダイレクト・リプログラミング法で作成した骨芽細胞移植による骨癒合促進方法の開発

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26462272
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 谷口 大吾 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (00642092)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 白井 寿治 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (20397186) ; 小田 良 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80516469) ; 藤原 浩芳 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90381962)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 骨芽細胞 / 遺伝子導入 / ダイレクトリプログラミング

Outline of Annual Research Achievements

早期に骨癒合を得る方法としてダイレクトリプログラミング法を用いて骨芽細胞を作成し移植する方法の確立を目的に研究を行う。皮膚線維芽細胞を平板培養し、骨芽細胞誘導遺伝子を組み込んだレトロウイルスベクターを使用し遺伝子導入を行う。遺伝子導入後、骨誘導培地に交換し、培養を継続する。本細胞を染色し、骨基質産生やRT-PCRで遺伝子発現を確認し、骨芽細胞としての機能を確認する。また、本細胞をラットに投与し、in vivoでの効果についても確認する。

ダイレクトリプログラミング法による骨芽細胞作成はips細胞などの多機能幹細胞から作成する場合と比較し、幹細胞を経由する必要がないため、癌化の危険が少なく、短時間で作成可能である。本方法で安全で大量の骨芽細胞を短時間で作成、利用することができれば超早期に骨癒合が得られ有用である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

26年度はラット皮膚線維芽細胞に対してダイレクトリプログラミング法を用いた骨芽細胞を作成した。
27年度は本細胞の骨芽細胞としての機能をin vitroで確認を行った。また、本細胞の投与方法として静脈内または腹腔内投与で局所に作用するための方法としてケモカイン受容体を遺伝子導入で発現させる方法を考案し細胞を作成した。

Strategy for Future Research Activity

ケモカイン受容体を発現した骨芽細胞の遊走能をin vitroおよびin vivoで確認し、その生体内での作用・効果を確認する予定である。

Causes of Carryover

想定していたよりも、in vivoイメージングの実験機械を使用開始が遅れたため、in vivoの実験が本年度中に推進できなかった分、次年度使用額が生じた。

Expenditure Plan for Carryover Budget

28年度はin vivoイメージングの実験を推進予定であり、試薬等の物品で使用する予定である。