膀胱内環境に生じるがん幹細胞シグナル異常の解明と膀胱癌診断マーカーの開発

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26462423
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 千原 良友 奈良県立医科大学, 医学部, 研究員 (40405395)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤本 清秀 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (50264867)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 膀胱癌 / がん幹細胞 / エピジェネティクス

Outline of Annual Research Achievements

前年度、in vitroで検討したFoxD3,BRCA1とがん幹細胞マーカーであるOCT3/4、SOX2のDNAメチル化レベルを臨床試料で検討した。1)正常尿路上皮組織と膀胱癌組織から抽出したDNAを用いて上記遺伝子のDNAメチル化レベルを検討した。正常尿路上皮と比較し、膀胱癌組織ではFoxD3、OCT3/4，BRCA1のDNAメチル化レベルは有意に低かった。一方SOX2のDNAメチル化レベルは膀胱癌組織で有意に高かった。2)同様の検討を担癌患者尿と健常者尿を対象として行った。FoxD3、BRCA1のDNAメチル化レベルは担癌患者尿で有意に低い結果となった。一方、SOX2、OCT3/4のDNAメチル化レベルは両群間で有意差を認めなかった。3)先行研究として、膀胱癌術後の経日的尿を用いてSOX2のDNAメチル化レベルと再発の有無を比較検討した。対象症例は20例で、観察期間中に再発を認めた症例を2例であった。このうち、1例では再発確認より3ヶ月前からSOX2のDNAメチル化レベルが上昇した。これらの結果より、FoxD3、BRCA1のDNAメチル化異常は膀胱癌特異的に生じ、尿中剥離細胞にも反映されることが示唆された。一方、正常尿路上皮と膀胱癌組織ではDNAメチル化異常に有意差を認めたがん幹細胞マーカー遺伝子は尿中薄利細胞では有意差を認めず、この結果は尿中剥離細胞には正常幹細胞の混入が多い、あるいは癌細胞の絶対数が少ない可能性が示唆された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

がん幹細胞のDNAメチル化異常が尿中剥離細胞にも反映される結果が得られた。

Strategy for Future Research Activity

膀胱癌術後の経日的患者尿の解析を中心に行い、尿細胞診では捉えられない悪性細胞の有無をDNAメチル化異常で検出することを目標とする。

Causes of Carryover

in vivoで、発癌とがん幹細胞のエピジェネティクス遺伝子発現機構の解析を行う。

Expenditure Plan for Carryover Budget

実験動物、試薬、機器に使用する。