2015 Fiscal Year Research-status Report
| Project/Area Number |
26462847
|
|---|
| Research Institution | Yokohama City University |
|---|
Principal Investigator |
小栗 千里 横浜市立大学, 医学部, 助教 (30400394)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中島 英行 横浜市立大学, 附属病院, 助教 (30437032)
來生 知 横浜市立大学, 医学部, 准教授 (30545059)
光藤 健司 横浜市立大学, 医学部, 准教授 (70303641)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | 温熱療法 / IL-1 / 口腔癌 / 分子標的薬 / 併用療法 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
進行口腔癌に対する治療は外科的療法が主体となるが、術後の機能・審美障害など抱える問題は多く、新たな治療法の開発が必要とされている。平成24年12月には頭頸部癌においても抗EGFR抗体薬（セツキシマブ）が臨床に導入され、その有効性が認められている。今後も口腔癌に対して新たな分子標的薬の誕生が期待される。本研究では、安全性が高くかつより高い抗腫瘍効果が得られる治療法の開発を目的に、サイトカインInterleukin-1(IL-1)阻害薬に温熱療法を加えることにより標的分子の発現誘導と腫瘍抑制に対する相乗効果、さらに早期の臨床応用を目指し、トランスレーショナル研究を行う。
これまでの研究の成果としては、in vitroにおいて口腔癌細胞株HSC-3とOSC-19を用いて温度条件と、インキュベーションタイムを様々な条件で検討し、IL-1RIの発現量を主にウェスタンブロッティングを用いて観察した。ウェスタンブロッティングでのdetectionの条件に付いても抗体の濃度などの条件検討を行った。温熱療法は43℃、1時間のインキュベーションタイムが最適として、この条件で、IL-1Ra(IL-1阻害薬）を併用して、MTT assay, Cell motility, Invasion assayを行ったところ、Cell motility assayにおいて有意に細胞の移動能の抑制が観察された。
今後は、アポトーシスの誘導の有無およびマウスを用いたin vivoでの実験を進めていく予定である。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
ウェスタンブロッティングによるIL-1Rの検出が非常に繊細であり、特異的なバンドを検出するための条件検討に時間を要した。
IL-1Ra（アンタゴニスト）の購入について、単価が高く、販売元が変わったりなどしたために購入に関して時間を要したとともに、実験の使用方法にも慎重になったため。
|
| Strategy for Future Research Activity |
・FACSを用いて、温熱療法とIL-1阻害薬の併用が、アポトーシスを誘導しているか否かの実験を行う。アポトーシスの誘導の有無をIn vitroで抗腫瘍効果が確認できた場合には、マウスの皮下腫瘍モデルを用いて併用療法を実施する。計時的に腫瘍のサイズを計測し、治療による腫瘍抑制効果を観察すると同時に、腫瘍を摘出して免疫組織学的に治療効果のメカニズムについても検討する。
・In vitro, in vivoともに最も効果的な治療の条件（投与量、投与時間、温熱後のIL-1阻害薬の投与するタイミングなど）を検討する。
・ヒト扁平上皮癌細胞移植ヌードマウスにおける温熱療法とIL-1阻害薬の併用療法による腫瘍抑制効果を検討する。腫瘍の大きさ、マウスの生存率をtime courseで計測する。またIL-1の発現程度、アポトーシスの誘導などを免疫染色、RT-PCRなどで検討する。
・IL-1阻害薬の購入について、予定していた額の範囲で安定して購入できるように検討する。
・学会にて研究成果を報告できるよう、実験データをまとめていく。
|
| Causes of Carryover |
予定していた動物実験が、平成27年度に行うことが出来なかったため、平成28年度行う予定となった。その分の実験費用が次年度分として生じたため。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成27年度に行うことが出来なかった動物実験を平成28年度に行う。マウス購入費、試薬代として使用する。動物実験が終了した後には、解析結果を総合的にまとめ、学会発表ならびに論文投稿を行う予定である。
|
