2014 Fiscal Year Research-status Report
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26462858
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
續橋 治 日本大学, 松戸歯学部, 講師 (80333110)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 口臭 / 口臭測定 / 細菌学的手法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
口腔に対する美意識が高まってきている近年、口臭を社会的醜悪と考えて、フレッシュできれいな息を求める人々が増えている。そこで本研究は、口臭原因物質の産生メカニズムに着目し、細菌学的手法を利用した簡易でコストパフォーマンスに優れ、さらには多数の検体を同時に検査することが可能な口臭検出キットの開発を行うことを目的としている。
平成26年度は研究実施計画通り、口臭簡易検出キットの試作品の開発に着手した。本研究はヒト舌背試料を対象としているために、本学部倫理委員会に本研究の申請を速やかに行い、承認を得た。また、本キットの有用性の検討、ならびに本キットにおける基準値に設定を定めるために優れた性能を有する口臭測定器が必要であったため、平成26年度の設備備品費で購入予定であった簡易ガスクロ方式を採用した口臭測定器を購入した。これを使用することにより、口臭の主たる原因である硫化水素などの濃度測定が可能で、口臭の有無の判別や口臭原因の特定が容易にできるようになった。本年度は計画通り、口臭簡易検出キットの試作品を作製することに成功した。キットの詳細は、容量5mlの滅菌バイアル瓶にシステイン加液体培地1mlを注入し、瓶キャップに長さ3cmのプラスチック板を取り付け、板面に酢酸鉛紙を張り付けた。そして被験者の舌背試料を瓶内の液体培地に漬け、プラスチック板を固定したキャップで瓶を固く閉める。その後、インキュベーターにて37℃で培養を行うと2～4時間程で酢酸鉛紙が黒変する量と時間で判定する。予備実験において、口臭測定器によって口臭群と無口臭群でグループ分けした被験者間では、有意に酢酸鉛紙が完全に黒変するまでに要する時間が異なり、口臭群では顕著に短時間で黒変した。今年度以降、本検出キットの有用性が示され、臨床の場で応用可能であるならば、口臭診断における質の向上と補助に大いに貢献できると考えられる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
現在の研究の進行状況は、概ね予定通り進行している。申請以前に予備実験にて、口臭簡易検出キット試作品の概要は練られていたために、問題なく簡便でかつ精度の高い測定が可能なキットを作製することが可能であった。また、平成26年度の設備備品費で購入した簡易ガスクロ方式を採用した口臭測定器センサーガスクロマトグラフODSA-P2の測定精度が高く、また簡便であることから円滑に計画が実行可能であった。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成27 年度は、前年度に開発した試作品の口臭簡易検出キットを用いて臨床試料を応用する。同時に口臭測定器センサーガスクロマトグラフODSA-P2 を用いて被験者の口腔気体中のVSC を測定し、口臭を有する群と無口臭群に分類し、さらには歯周病罹患群と歯周健常群にわけて、本検出キットの結果と比較検討することにより本検出キットの有用性の確認および基準値の設定を行なう。また目的とする各菌種を検出する選択培地に試料を接種することにより、培養後に形成された集落を数えることにより、それぞれの菌数の確認を行ない、分離した菌株のDNA を抽出し、PCR 法にて菌種確認をする。これにより、高いVSC を産生する菌種のパターンを検索し、口臭のメカニズムの解析も行ないたいと考えている。その後、得られた臨床データを分析し、口臭診断における本検出キットの有用性の確認および歯周病の診断にも有用であるか否かを検討する。また、試験管的にVSC 産生菌群を培養し、それぞれの菌数を同数になるように調整して、本キットに接種し硫化水素量を判定するとともに、各菌種が培養時に発生するガスを採取し、口臭測定器センサーガスクロマトグラフODSA-P2 にてVSC の濃度を調査する。これにより前年度の臨床応用で得られたVSC 産生菌群の各群のパターンと比較検討することにより、口臭の主たる原因菌を特定したいと考えている。
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| Causes of Carryover |
平成26年度に購入した口臭測定器（アルファモスジャパン株式会社、センサーガスクロマトグラフODSA-P2）が、予定していた購入価格よりも安く購入できたので次年度使用額が生じてしまった。また他の購入予定であった消耗品等は、予定していた金額で購入できたので差額を補填することなく次年度使用額を生じる結果となった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成26年度に生じた次年度使用額に関しては、当初予定していた口臭に関わる細菌以外で、最近の論文で口臭に関わるものとして報告のある細菌を菌種同定するための菌種特異的プライマーを購入することを計画している。
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