2014 Fiscal Year Research-status Report
口腔粘膜上皮前駆／幹細胞による粘膜再生機構の解明―血管新生の意義―
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26463059
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
芳澤 享子 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (60303137)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
泉 健次 新潟大学, 医歯学系, 教授 (80242436)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 移植・再生医療 / 口腔顎顔面再建外科学 / 上皮幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
私たちはティッシュエンジニアリングの手法より開発した培養口腔粘膜の臨床応用とその粘膜再生能について検討を重ね、培養口腔粘膜は口腔粘膜を良好に再生させることを明らかにした。しかし現在の培養方法では上皮細胞は増殖能、分化能が不均一な細胞集団であり、患者によっては細胞増殖能の劣る培養口腔粘膜が作製される恐れがある。そこで口腔粘膜上皮細胞集団の中から増殖能が高い均一な細胞集団である口腔粘膜上皮前駆／幹細胞集団を選別してEVPOMEを作製し、移植後の粘膜再生能を評価したところ、良好な再生能と上皮細胞の長期の生存が示され、さらにその再生過程に血管新生が関与していることが示唆された。そのため本研究では細胞増殖能の高いEVPOMEによる粘膜再生機構の解明と特に新生血管がどのように関与するのかを検討する。平成26年度はまず患者より採取した口腔粘膜より口腔上皮細胞を培養し、口腔粘膜上皮前駆／幹細胞集団と考えられる小型細胞集団を選別し、選別しない細胞集団と細胞増殖能を比較検討した。その結果、両群間の増殖能は小型細胞集団の方が若干優れている傾向にあり、また両群の上皮細胞で作製したEVPOMEにおいて増殖マーカーと幹細胞マーカーによる形態学的検索では、小型細胞集団の方が増殖マーカー陽性細胞の多い傾向にあった。しかしながら幹細胞マーカーであるp63は陽性細胞分布に一定の傾向は見いだせなかった。またIntegrin-α6、CD71は陽性細胞と陰性細胞の違いが不明瞭でさらに染色の条件決めの検討が必要と考えられた。そのため平成27年度に引き続き幹細胞マーカーの検索を行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
EVPOMEの上皮における幹細胞マーカーによる免疫染色の結果が、p63は特定の傾向のある染色性にならず、Integrin-α6、CD71は陽性細胞と陰性細胞の違いが不明瞭であったため、平成27年度に幹細胞マーカーの抗体による免疫染色の検討が必要であるため
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| Strategy for Future Research Activity |
平成27年度には両群のEVPOMEについて平成26年度にできなかった幹細胞マーカーによる免疫組織化学的検索を行うと同時に、ヌードマウス背部皮下移植モデルおよび口腔内移植モデルを用いて両群のEVPOMEと周囲組織について組織学的に検索する。
平成28年度は両移植モデルより採取した試料を用いて免疫組織化学的にEVOPOME、周囲組織の動態を検索する。
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| Causes of Carryover |
幹細胞マーカーによる免疫組織化学的検索の結果が不十分であったため、すべての試料でその検討ができず、試薬の金額分が使用できなかった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成27年度で幹細胞マーカーによる免疫組織化学的検索をさらに行うため、平成26年度分は平成27年度分と合算して使用する。
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