2015 Fiscal Year Research-status Report
歯周病原細菌排除におけるカスパーゼの役割と炎症反応制御に関する研究
| Project/Area Number |
26463138
|
|---|
| Research Institution | Fukuoka Dental College |
|---|
Principal Investigator |
金子 高士 福岡歯科大学, 歯学部, 教授 (10284697)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
原 宜興 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (60159100)
吉村 篤利 長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (70253680)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | 歯周病原細菌 / Caspase 1 / Caspase 4 / Caspase 5 / NLRP3 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
病原性を示す細菌の特徴の一つとして細胞内侵入能および細胞内生存能があるが、細胞内に侵入した細菌がどのようにして排除されるかは明らかになっていない。近年、細胞質およびエンドソーム内の自然免疫受容体が細胞内細菌を検知し、カスパーゼ１、４、５を活性化し、ピロトーシスを呼ばれる形態の細胞死を誘導することで細胞内内容物とともに細菌を細胞外に放出し、除菌する機序が報告された。しかしながら歯周病原細菌とカスパーゼ活性化との関連に関する研究はほとんど存在しない。そこで本研究では細胞内侵入歯周病原細菌のクリアランスにおけるカスパーゼ１、４、５活性化とピロトーシスの役割に関して基礎研究を行う。
前年度は歯肉上皮細胞株のHSC-2細胞を用いて歯周病原細菌（P. gingivalis, F. nucleatum）の細胞内侵入能について実験を行った結果、P.gingivalisは0.36%, F.nucleatumは0.14%であった。しかしながらHSC-2細胞でのカスパーゼ１、５の発現量が少なかったことから、今年度はヒトマクロファージ細胞株のTHP-1細胞を用い、実験を行った。THP-1細胞をP.gingivalis, F.nucleatumで刺激するとcaspase1 mRNAの発現はそれぞれ未刺激と比較して0.82と0.77で、コントロールのE.coliの1.89と比較して減少していた。しかしながらタンパク発現量は、P.gingivalisではcaspase1の発現は変わらなかったが、F.nucleatum, E.coliでは増加していた。またピロトーシスは３菌種でそれぞれ差は認められなかった。これらの結果から歯周病原細菌のcaspase1のタンパク発現には、さまざまな機序があることが考えられた。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
所属研究機関が長崎大学より福岡歯科大学に変更になり、研究環境の整備や研究条件の設定に時間を要したために研究の進捗状況はやや遅れている。HSC-2細胞ではカスパーゼ１のタンパク発現の検出は困難であったため、THP-1細胞でも実験を並行して行っている。
|
| Strategy for Future Research Activity |
研究備品を整備しつつ、研究計画に従い実験を遂行する。実験の遅れを取り戻すべく、THP-1細胞を用いてカスパーゼ４、５についても解析を進めていく。
|
| Causes of Carryover |
所属研究機関が長崎大学より福岡歯科大学に変更になり、実験中止期間に伴う実験の遅延が生じたこと、また当初計画していたHSC-2での実験が、カスパーゼ１、４、５の発現量が少なかったことにより計画どおりに実験が進行しなかったことから次年度使用額が生じた。
|
| Expenditure Plan for Carryover Budget |
実験環境も整備されつつあるので、今後は実験の遅れを取り戻すべく、実験を遂行していく予定である。
|
