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2015 Fiscal Year Annual Research Report

受精卵におけるタンパク質ノックダウン法の開発

Research Project

Project/Area Number 26640063
Research InstitutionNagahama Institute of Bio-Science and Technology

Principal Investigator

中村 肇伸  長浜バイオ大学, バイオサイエンス学部, 准教授 (80403202)

Project Period (FY) 2014-04-01 – 2016-03-31
Keywordsオートファジー / 母性タンパク質 / タンパク質ノックダウン
Outline of Annual Research Achievements

精子と卵子は、受精後にリプログラミングされることにより、全能性を再獲得するが、その分子機構については、不明な点が多く残されている。これは、受精卵には卵子から持ち越されるタンパク質が大量に存在し、RNA 干渉法が有効に働かず、他に適切な実験系がないことが大きな要因であると考えられる。そこで、本研究では、細胞が有するタンパク質分解系であるオートファジーを利用した新規タンパク質ノックダウン法を開発することを目的とする。
前年度までに、ライソソームとの結合に必要なペプチドとプロテインA とを融合させたキメラタンパク質を作製し、受精卵においてEGFPタンパク質を分解できることを明らかにした。
今年度は、受精卵に豊富に存在するStellaのノックダウンを試みた。その結果、受精卵においてStellaタンパク質の分解はほとんど起こらなかった。Stellaは、受精卵で核内に局在し、クロマチンと結合することが明らかになっている。したがって、本研究で開発した方法は、核に存在するタンパク質には適用できないことが示唆された。

  • Research Products

    (19 results)

All 2016 2015 Other

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results,  Open Access: 5 results,  Acknowledgement Compliant: 2 results) Presentation (11 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results,  Invited: 3 results) Book (2 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Trichostatin A specifically improves the aberrant expression of transcription factor genes in embryos produced by somatic cell nuclear transfer.2015

    • Author(s)
      Inoue K, Oikawa M, Kamimura S, Ogonuki N, Nakamura T, Nakano T, Abe K, Ogura A.
    • Journal Title

      Scientific Rep

      Volume: 5 Pages: 10127

    • DOI

      10.1038/srep10127

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Human Dynactin-Associated Protein Transforms NIH3T3 Cells to Generate Highly Vascularized Tumors with Weak Cell-Cell Interaction.2015

    • Author(s)
      Kunoh T, Wang W, Kobayashi H, Matsuzaki D, Togo Y, Tokuyama M, Hosoi M, Koseki K, Wada S, Nagai N, Nakamura T, Nomura S, Hasegawa M, Sasaki R, Mizukami T.
    • Journal Title

      PLoS ONE

      Volume: 10 Pages: e0135836

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0135836

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Stella controls chromocenter formation through regulation of Daxx expression in 2-cell embryos.2015

    • Author(s)
      Arakawa T, Nakatani T, Oda M, Kimura Y, Sekita Y, Kimura T, Nakamura T, Nakano T.
    • Journal Title

      Biochem. Biophys. Res. Commun.

      Volume: 466 Pages: 60-65

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2015.08.106

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] De novo DNA methylation through 5’-segment of the H19 ICR maintains its imprint during early embryogenesis2015

    • Author(s)
      Matsuzaki H, Okamura E, Takahashi T, Ushiki A, Nakamura T, Nakano T, Hata K, Fukamizu A, Tanimoto K.
    • Journal Title

      Development

      Volume: 142 Pages: 3833-3844

    • DOI

      10.1242/dev.126003

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Global DNA hypomethylation coupled to cellular transformation and metastatic ability2015

    • Author(s)
      Funaki S, Nakamura T, Nakatani T, Umehara H, Nakashima H, Okumura M, Oboki K, Matsumoto K, Saito H, Nakano T.
    • Journal Title

      FEBS lett

      Volume: 589 Pages: 4053-4060

    • DOI

      10.1016/j.febslet.2015.11.020

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] Critical function of Klf17 for the zygotic genome activation in mice2016

    • Author(s)
      Yui Goto, Asuka Furuta, Kenji Suzuki, Takashi Kohda, Masahito Ikawa, Toshinobu Nakamura
    • Organizer
      International Symposium on “Epigenome dynamics and regulation in germ cells”
    • Place of Presentation
      Kyoto, Japan
    • Year and Date
      2016-02-17 – 2016-02-19
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 全能性細胞で特異的に発現するKlf17の初期発生における必要性2015

    • Author(s)
      後藤 悠比、鈴木 健士、古田 明日香、幸田 尚、伊川 正人、中村 肇伸
    • Organizer
      BMB2015(第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会大会 合同大会)
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2015-12-01 – 2015-12-04
    • Invited
  • [Presentation] High-affinity, poly-reactive IgA is required for gut homeostatic maintenance to prevent colitis in mice2015

    • Author(s)
      Shinsaku Okai, Fumihito Usui, Makoto Hasegawa, Toshinobu Nakamura, Kazuya Yamamoto, Eri Nishiyama, Hiroshi Mori, Takuji Yamada, Ken Kurokawa, Tamotsu Kato, Eiji Miyauchi, Hiroshi Ohno, Reiko Shinkura
    • Organizer
      BMB2015(第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会大会 合同大会)
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2015-12-01 – 2015-12-04
  • [Presentation] High-affinity, poly-reactive IgA is required for gut homeostatic maintenance to prevent colitis in mice2015

    • Author(s)
      Shinsaku Okai, Fumihito Usui, Makoto Hasegawa, Toshinobu Nakamura, Kazuya Yamamoto, Eri Nishiyama, Hiroshi Mori, Takuji Yamada, Ken Kurokawa, Tamotsu Kato, Eiji Miyauchi, Hiroshi Ohno, Reiko Shinkura
    • Organizer
      第44回日本免疫学会学術集会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      2015-11-18 – 2015-11-20
  • [Presentation] 全能性細胞で特異的に発現する遺伝子群の機能解析2015

    • Author(s)
      中村 肇伸
    • Organizer
      神戸大学農学部 第33回インターゲノミクスセミナー
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2015-11-13 – 2015-11-13
    • Invited
  • [Presentation] Vitamin B1栄養が卵子の質におよぼす影響2015

    • Author(s)
      辻 愛、中村 肇伸、柴田 克己
    • Organizer
      第54回 日本栄養食糧学会 近畿支部大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2015-10-10 – 2015-10-10
  • [Presentation] Critical functions of totipotent-cell specific genes Klf17 and Btg4 in zygotic reprogramming2015

    • Author(s)
      Kenji Suzuki, Yui Goto, Asuka Furuta, Takashi Kohda, Masahito Ikawa, Toshinobu Nakamura
    • Organizer
      The 40th Naito Conference Epigenetics "From Histone Code to Therapeutic Strategy"
    • Place of Presentation
      Sapporo, Japan
    • Year and Date
      2015-09-15 – 2015-09-18
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 全能性細胞で高発現するBtg4の初期発生における必要性2015

    • Author(s)
      鈴木 健士、後藤 悠比、古田 明日香、伊川 正人、中村 肇伸
    • Organizer
      文部科学省科学研究費補助金 新学術領域研究「生殖細胞のエピゲノムダイナミクスとその制御」第3回若手勉強会
    • Place of Presentation
      静岡県
    • Year and Date
      2015-07-22 – 2015-07-24
  • [Presentation] 初期胚のクロマチン再構成におけるヒストンシャペロンの役割 ~DNA脱メチル化制御因子Stella欠損 胚をモデルとして~2015

    • Author(s)
      荒川 達彦、中谷 庸寿、小田 昌朗、木村 康義、関田 洋一、木村 透、中村 肇 伸、仲野 徹
    • Organizer
      文部科学省科学研究費補助金 新学術領域研究「生殖細胞のエピゲノムダイナミクスとその制御」第3回若手勉強会
    • Place of Presentation
      静岡県
    • Year and Date
      2015-07-22 – 2015-07-24
  • [Presentation] マウス受精卵におけるStellaの雌性ゲノム保護とその初期胚発生への重要性2015

    • Author(s)
      中谷 庸寿、山縣 一夫、木村 透、小田 昌朗、中島 啓行、堀 真由子、関田 洋 一、荒川 達彦、中村 肇伸、仲野 徹
    • Organizer
      第9回日本エピジェネティクス研究会年会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2015-05-25 – 2015-05-26
  • [Presentation] Biotin-deficient diet induces abnormal oocyte in mouse2015

    • Author(s)
      Ai Tsuji, Toshinobu Nakamura, Katsumi Shibata
    • Organizer
      12th Asian Congress of Nutrition
    • Place of Presentation
      Yokohama, Japan
    • Year and Date
      2015-05-14 – 2015-05-18
    • Int'l Joint Research
  • [Book] 生体の科学「着床前胚と始原生殖細胞におけるDNAメチル化リプログラミング」2015

    • Author(s)
      中村 肇伸
    • Total Pages
      7
    • Publisher
      医学書院
  • [Book] 細胞工学「母性因子を用いたiPS細胞の樹立効率と質の改善」2015

    • Author(s)
      中村 肇伸
    • Total Pages
      8
    • Publisher
      学研メディカル秀潤社
  • [Remarks] 中村肇伸准教授らの共同研究が『Nature communications』に掲載されました

    • URL

      http://www.nagahama-i-bio.ac.jp/research/

URL: 

Published: 2017-01-06  

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