2014 Fiscal Year Research-status Report
UV-B受容体と超短パルスレーザーを用いた遺伝子発現誘導系の開発
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26650096
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
青山 卓史 京都大学, 化学研究所, 教授 (80202498)
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2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 誘導系 / UV / 植物転写因子 / 超短パルスレーザー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、近年同定された植物の紫外線(UV-B)受容体タンパク質UVR8と超短パルスレーザー発振装置を利用して、時間的、空間的な分解能に優れた遺伝子発現誘導系の開発を行なうものである。平成26年度においては主に、UVR8改変タンパク質を有した植物体内転写誘導系の開発を行った。まず単純化した誘導系の基礎となるとして、UVR8にLexAのDNA結合ドメインを融合したもの（LexA-UVR8）、LexA-UVR8にVP16の転写活性化ドメインを加えたもの（LexA-VP16-UVR8）、UVR8に強いリプレッサードメインを融合したもの（UVR8-RD）を各々カリフラワーモザイクウィルスの35Sプロモーターを用いて発現する遺伝子を作成し、形質転換シロイヌナズナ系に導入した。また、LexA認識配列を有するプロモーターの下流にYFPコード領域をつないだレポーター遺伝子（LexApro-YFP）を作成し、これも形質転換シロイヌナズナ系に導入した。これらの形質転換シロイヌナズナ株の中で適切なものを選抜し、それらを掛け合わせることでUVR8転写誘導系を確立する。
これと平行して、野生型シロイヌナズナを用いてUV-B紫外線による内在性遺伝子の発現誘導実験を行い、シロイヌナズナにおける紫外線照射条件の設定を前もって検討した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
最も時間を要する形質転換シロイヌナズナ系の開発が進み、植物体に対する紫外線照射条件も設定されたことから、研究全体は順調に進展していると判断される。
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| Strategy for Future Research Activity |
予定通り、転写誘導系を有する形質転換シロイヌナズナの開発を続けるとともに、超短パルスレーザーの照射実験を27年度後半から始める。UVR8の構造と機能に関する研究は現在も急速に進展しており、新しい知見が得られている。その中で本研究にとって有用なものを随時取り入れつつ、実用的な転写誘導系の開発を目指す。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] Characteristics of a root hair-less line of Arabidopsis thaliana under physiological stresses.2014
Author(s)
Tanaka, N., Kato, M., Tomioka, R., Kurata, R., Fukao, Y., Aoyama, T., and Maeshima, M.
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Journal Title
J. Exp. Bot.
Volume: 65
Pages: 1497-1512
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] TRANSLUCENT GREEN, an ERF family transcription factor, controls water balance in Arabidopsis by activating the expression of aquaporin genes.2014
Author(s)
Zhu, D., Wu, Z., Cao, G., Li, J., Wei, J., Tsuge, T., Gu, H., Aoyama, T., and Qu, L.-J.
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Journal Title
Mol. Plant
Volume: 7
Pages: 601-615
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Auxin transport sites are visualized in planta using fluorescent auxin analogs.2014
Author(s)
Hayashi, K., Nakamura, S., Fukunaga, S., Nishimura, T., Jenness, M.K., Murphy, A.S., Motose, H., Nozaki, H., Furutani, M., and Aoyama, T.
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Journal Title
Proc. Natl. Acad. Sci. USA.
Volume: 111
Pages: 11557-11562
DOI
Peer Reviewed
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[Book] Plant Cell Wall Patterning and Cell Shape (Ed., Fukuda H.)2014
Author(s)
Kusano, H., Tominaga, R., Wada, T., Kato, M., and Aoyama, T.
Total Pages
432
Publisher
Wiley-Blackwell
