2014 Fiscal Year Research-status Report
菌類ウイルスMoCVsはイネいもち病菌の病原性レース変異に関与しているか
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26660033
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| Research Institution | Tokyo University of Agriculture and Technology |
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Principal Investigator |
寺岡 徹 東京農工大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (60163903)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | マイコウイルス / 病原性変異 / 簡易検出法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1． マイコウイルスMoCV1がイネいもち病菌の病原性をトランスポゾンのようにゲノム変異を伴わずに変化させていることを確認するために、自然感染の親株(WI)から得たフリー化株(WF)にハイグロマイシン耐性変異を導入したフリー株(HF)を作出し、さらにHF株と親株のWI株との菌糸融合により人工再感染株(HI)を作出した。病原性変異の観察されたいくつかのイネ判別品種との組合せにおいて、親株WI株がフリー化(WF及びHF)することにより変化した病原性が再感染させたHI株では元のWI株の病原性に可逆的に復帰したことから、我々の見出した現象を再確認した。
2． MoCV1のレース変異機構の一端を解明する目的で、イネ－いもち病菌相互作用決定するいもち病菌のAvr遺伝子のひとつAvr-Pikの発現をMoCV1が感染したWI株、HI株とフリー化したWF株、HF株の間で、real-time RT-PCRによる発現解析を行ったところ、多くの組合せでMoCV1感染によりAvr-Pik発現量が減少していた。
3． イネいもち病病斑および培養基から直接MoCV1を簡易検出できるone-step RT-PCR法に加えて、いもち病発生圃場現場でも検出可能なRT-LAMP法も開発し、当初の発見地ベトナム圃場以外の日本国内にもMoCV1は広く昔から分布していること、ゲノム配列からも近縁であることが実証された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
既に開発したOne-step RT-PCRによるいもち病斑からのMoCV1の直接的な検出法を報文化すると共に、LAMP法による圃場現場での検出法も開発、公表した。従来の電気泳動によるdsRNA検出法とあわせて、日本各地（北陸地方ならびに九州地方）のいもち病菌保存株と昨年MoCV1を見出した山形県、秋田県のいもち病発生圃場からも、MoCV1を検出することができ、本ウイルスは以前から広く日本にも分布していたことが確認された。
これらのことから、ベトナム株に依存せずに日本国内で日本産のMoCV1株を使用した実験が可能となり、圃場における動態解析も容易になると考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
開発・公表したMoCV1簡易検出法を活用して、日本国内のMoCV1の分布と動向をさらに調査すると共に、直接イネのいもち病斑から、より強い病原力抑制力を持ち、病原性を強く変化させる新規なウイルス株を、基準いもち病菌株（例えば病原性の安定したP2 株）に獲得・確保できる手法の開発を目指す。同時に、基準いもち病菌株にMoCV1を集積確保することで、病原性変異機構、病原力抑制機構もより明確になることが期待される。
また、MoCV1ゲノムの5つのセグメント(ORF)を個別に導入したいもち病菌形質転換株の作出も試みており、どのセグメント(ORF) がそれらの機構に深く関わっているかの解析に向けて精力を傾注する。
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| Causes of Carryover |
平成26年度はできる限り、日本各地のイネいもち病病斑を採集、確保する目的に費やし、消耗品を含む物品費の支出はできる限り抑制した。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年(平成27)度はイネいもち病発生圃場の再調査費用ならびに本質的課題内容のMoCV1の病原性変異機構の解明に向けた資材確保、公表に本年(平成26)度の残額も含めて、使用する予定である。
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