2015 Fiscal Year Annual Research Report
乳エキソソーム中のウイルス成分検出による農家単位での牛白血病診断手法の開発
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26660239
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
猪島 康雄 岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (20355184)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | エキソソーム / 生乳 / バルク乳 / 牛白血病 / 牛白血病ウイルス / 診断法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、タンクに集められた牛の生乳（バルク乳）からエキソソームを分離・精製し、牛白血病ウイルス(BLV)を検出、BLVの感染状況を農家単位で一括診断する手法の開発を目的とする。具体的には、以下の2点について研究を進める。
（１）牛の生乳から効率よくエキソソームを分離・精製する方法を確立する。
（２）バルク乳エキソソーム内のBLV成分（蛋白と核酸）を検出することにより、BLV感染状況を農家単位で全頭一括診断する手法を開発する。
本年度はBLVに感染しているが発症していない比較的若い牛を選別した。前年度の成果をもとに、超遠心の繰り返しとエキソソーム分離試薬を併用することで得られた生乳エキソソームからBLV蛋白の検出を試みた。BLVのエンベロープ、及びgag蛋白を認識する3種類の抗体を用いたウェスタンブロッティングでは、BLV蛋白を検出することはできなかった。また、PCRやLAMP法によるBLV遺伝子の検出もできなかった。以前の実験では血中BLVコピー数の多い高齢牛の生乳エキソソームからはBLV蛋白が検出されたことから、ウェスタンブロッティングによる生乳エキソソーム内のBLV蛋白の検出感度は、感染牛の血中BLVコピー数と相関する可能性が示唆された。このことから生乳エキソソームを利用した新たなBLV感染牛のモニタリング手法・農家単位での一括診断手法の開発に向けた基礎的なデータを得ることに成功した。
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Research Products
(14 results)
