2015 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子導入による膜電位律動機能付与のための分子ツールキットの開発
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26670102
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
岡村 康司 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80201987)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | イオンチャネル / 膜電位 / リン脂質 / ペースメーカー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
HCNチャネル（mHCN2のホモテトラマー）のPIP2感受性部位について、ツメガエル卵母細胞を用いた発現系で電気生理解析を行った結果、GV カーブの負の電位へのシフトとコンダクタンスの減少を見いだし、VSPを用いてHCNチャネルの活性を制御できることを見いだした。一方で、この変化については細胞毎のばらつきが大きく、cAMPによる調節能をもつHCNチャネルにおいて細胞毎のcAMP量の違いがこの原因と成っていると予測されたので、cAMP感受性を失う変異体をイタリアの研究グループから供与してもらい、VSPとの共発現を試みた。しかし、cAMP感受性を失った変異体ではHCNチャネルの電流量が小さく、VSPの効果の検出が困難であり、HCNチャネルやVSPクローンの選別、および発現系細胞などの変更を検討する必要が生じた。今後stable cell lineを作成するステージなどへ進展するには、一過的発現系での詳細な検討が必要であると同時に、数理モデリングなどによる、自律能機能獲得を目指した、戦略的な実験のデザインが必要と考えられる。HCNチャネル、Kチャネル、VSPの発現量のコントロールと各因子の分子特性を両方勘案して実験を計画することが求められる。これらを再検討しながら、次のステップに繋げていく予定である。
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