2015 Fiscal Year Annual Research Report
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26670212
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
永井 宏樹 大阪大学, 微生物病研究所, 准教授 (80222173)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 細菌 / オートファジー / レジオネラ / サルモネラ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
レジオネラによるゼノファジー回避の機構を解析するため、サルモネラとの共感染系を使ってレジオネラエフェクタータンパク質の網羅的な解析を行った結果、ゼノファジーに必須なオートファジー関連タンパク質 LC3 の細菌内包液胞へのリクルートメントを阻害する１つのレジオネラタンパク質を同定することができた。この結果を受けて今年度はこのタンパク質の機能解析を進めた。このエフェクターは LC3 だけでなく、LC3 のシグナル分子として知られるユビキチンやシグナル分子と LC3 の間を媒介するアダプタータンパク質の細菌内包液胞へのリクルートメントも阻害することが明らかとなった。このタンパク質はプロテアーゼとしての予測される活性部位を持っていたため、酵素活性部位への変異の導入を行い、細胞内発現系を構築した。細胞内での発現系で酵素活性部位依存的にユビキチンリクルートメントの阻害が起こることが確認できた。また、野生型及び変異型のタンパク質を大腸菌発現系を用いて精製し、宿主細胞の膜を半透過性になるよう処理した semi in vitro 系に加える解析により、このタンパク質が細菌内包膜に結合したユビキチンを切断する活性を持つことが示唆された。これらの結果から本研究は、レジオネラのゼノファジー抑制の一つの経路としてオートファジーシグナルであるユビキチンの制御に関わると考えられるエフェクタータンパク質を見出すことに成功したと意義付けられる。
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