尿中輸送体測定を用いた降圧利尿薬オーダーメイド医療の開発

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26670428
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 蘇原 映誠 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (90510355)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 塩分感受性 / WNKキナーゼ

Outline of Annual Research Achievements

偽性低アルドステロン症２型原因遺伝子として、WNK1及びWNK4が同定されており、新たにKLHL3とCullin3がPHAIIの原因遺伝子として同定されたことから、ヒトPHAII患者と同じ変異を持つKLHL3R528H/+ノックインマウスを作成解析し、WNKがKLHL3と結合して蛋白分解系に取り込まれること、PHAII変異によってWNK蛋白の分解が減ることによって、WNKシグナルが亢進するため発症することを解き明かした(Hum Mol Genet. 2014)。また、質量分析を用いてKLHL3のリン酸化サイトを同定し、PKAとAktによるKLHL3リン酸化がWNK4との結合を制御することを明らかにした。これはインスリンやバゾプレッシンによるWNKシグナル制御の生理的メカニズムの１つであると考えられた(BBRC 2015)。また、WNKはKLHL2/3-CUL3複合体によるユビキチン修飾後、プロテアソームによる分解だけでなく、p62を介した選択的オートファジーによる制御も受けていることを報告した（J Am Soc Nephrol. 2015, Biochem J. 2015）。また、新しいWNKの下流にあるSPAK阻害薬のスクリーニングを行い、報告した(J Am Soc Nephrol. 2015)。尿中輸送体測定はNCCとAQP2は測定可能(AJP. 2013)となったが、NKCC2については測定系の作成を試み、継続中である。

Research Products

• [Journal Article] Comprehensive genetic testing approach for major inherited kidney diseases, using next-generation sequencing with a custom panel. (2016)
  • Author(s): Mori T, Hosomichi K, Chiga M, Mandai S, Nakaoka H, Sohara E, Okado T, Rai T, Sasaki S, Inoue I, Uchida S.
  • Journal Title: Clin Exp Nephrol. Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Kelch-like 3/Cullin 3 ubiquitin ligase complex and WNK signaling in salt-sensitive hypertension and electrolyte disorder. (2016)
  • Author(s): Sohara E, Uchida S.
  • Journal Title: Nephrol Dial Transplant. Volume: 印刷中 Pages: 印刷中
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Generation and analysis of knock-in mice carrying pseudohypoaldosteronism type II-causing mutations in the cullin 3 gene. (2015)
  • Author(s): Araki Y, Rai T, Sohara E, Mori T, Inoue Y, Isobe K, Kikuchi E, Ohta A, Sasaki S, Uchida S.
  • Journal Title: Biol Open. Volume: 4 Pages: 1509-1517
  • DOI: 10.1242/bio.013276.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Impaired degradation of WNK by Akt and PKA phosphorylation of KLHL3. (2015)
  • Author(s): Yoshizaki Y, Mori Y, Tsuzaki Y, Mori T, Nomura N, Wakabayashi M, Takahashi D, Zeniya M, Kikuchi E, Araki Y, Ando F, Isobe K, Nishida H, Ohta A, Susa K, Inoue Y, Chiga M, Rai T, Sasaki S, Uchida S, Sohara E.
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun. Volume: 467 Pages: 229-234
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.09.184
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Generation of Hypertension-Associated STK39 Polymorphism Knockin Cell Lines With the Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas9 System. (2015)
  • Author(s): Mandai S, Mori T, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • Journal Title: Hypertension. Volume: 66 Pages: 1199-1206
  • DOI: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.05872.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Involvement of selective autophagy mediated by p62/SQSTM1 in KLHL3-dependent WNK4 degradation. (2015)
  • Author(s): Mori Y, Mori T, Wakabayashi M, Yoshizaki Y, Zeniya M, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • Journal Title: Biochem J. Volume: 472 Pages: 33-41
  • DOI: 10.1042/BJ20150500.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Kelch-Like Protein 2 Mediates Angiotensin II-With No Lysine 3 Signaling in the Regulation of Vascular Tonus. (2015)
  • Author(s): Zeniya M, Morimoto N, Takahashi D, Mori Y, Mori T, Ando F, Araki Y, Yoshizaki Y, Inoue Y, Isobe K, Nomura N, Oi K, Nishida H, Sasaki S, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • Journal Title: J Am Soc Nephrol. Volume: 26 Pages: 2129-2138
  • DOI: 10.1681/ASN.2014070639.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Discovery of Novel SPAK Inhibitors That Block WNK Kinase Signaling to Cation Chloride Transporters. (2015)
  • Author(s): Kikuchi E, Mori T, Zeniya M, Isobe K, Ishigami-Yuasa M, Fujii S, Kagechika H, Ishihara T, Mizushima T, Sasaki S, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • Journal Title: J Am Soc Nephrol. Volume: 26 Pages: 1525-1536
  • DOI: 10.1681/ASN.2014060560.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] Generation and analysis of knock-in mice carrying pseudohypoaldosteronism type II-causing mutations in the cullin 3 gene. (2015)
  • Author(s): Araki Y, Rai T, Sohara E, Mori T, Inoue Y, Kikuchi E, Uchida S.
  • Organizer: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • Place of Presentation: San Diego(USA)
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Combination of Low Body Mass Index and Serum Albumin Level Leads to Chronic Kidney Disease Progression: The Chronic Kidney Disease–Research of Outcomes in Treatment and Epidemiology Study. (2015)
  • Author(s): Kikuchi H, Kanda E, Iimori S, Naito S, Sasaki S, Sohara E, Okado T, Rai T, Uchida S.
  • Organizer: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • Place of Presentation: San Diego(USA)
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Generation of Hypertension-Associated STK39 Polymorphism Knock-in Cell Lines with the CRISPR/Cas9 System. (2015)
  • Author(s): Mandai S, Mori T, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • Organizer: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • Place of Presentation: San Diego(USA)
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Potassium-induced dephosphorylation of renal sodium-chloride cotransporter is NOT dependent on the anions. (2015)
  • Author(s): Nomura N, Shoda W, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • Organizer: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • Place of Presentation: San Diego(USA)
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] The Major Contribution of WNK4 to the Pathogenesis of Pseudohypoaldosteronism Type II (PHAII) Caused by the KLHL3 Mutation R528H. (2015)
  • Author(s): Susa K, Sohara E, Takahashi D, Rai T, Uchida S.
  • Organizer: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • Place of Presentation: San Diego(USA)
  • Year and Date: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Angiotensin II による 血管平滑筋収縮における, KLHL2-WNK3-SPAK-NKCC1 カスケードの関与. (2015)
  • Author(s): 銭谷 慕子, 高橋 大栄, 森 雄太郎, 森 崇寧, 蘇原 映誠, 頼 建光, 内田 信一.
  • Organizer: 第 6 回分子腎臓フォーラ ム.
  • Place of Presentation: グランフロント大阪(大阪府,大阪市)
  • Year and Date: 2015-09-05 – 2015-09-05
• [Presentation] 遺伝性腎疾患が明らかにする腎生理と新たな創薬への道. (2015)
  • Author(s): 蘇原 映誠, 森 崇寧, 頼 建光, 内田 信一.
  • Organizer: 第 58 回日本腎臓学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • Year and Date: 2015-09-05 – 2015-09-05
  • Invited
• [Presentation] 次世代シークエン サーを用いた遺伝性腎疾患網羅的診断キットの開発. (2015)
  • Author(s): 森 崇寧, 細道 一善, 蘇原 映誠, 頼 建光, 佐々木 成, 井ノ上 逸朗, 内田 信一.
  • Organizer: 第58回日本腎臓学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • Year and Date: 2015-09-05 – 2015-09-05
• [Presentation] p62/SQSTM1 が関わる WNK4 の選択的オートファジーと偽性低アルドステロン症 II 型との関わり (2015)
  • Author(s): 森 雄太郎, 森 崇寧, 若林 麻衣, 銭谷 慕子, 蘇原 映誠, 頼 建光, 佐々木 成, 内田 信一
  • Organizer: 第 58 回日本腎臓学会学術総会.
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • Year and Date: 2015-09-05 – 2015-09-05
• [Presentation] PKAとAktによるKLHL3リン酸化がWNK4との 結合を制御する. (2015)
  • Author(s): 吉崎幸, 蘇原映誠, 森崇寧, 若林麻衣, 高橋大栄, 銭谷慕子, 菊池絵梨子, 森雄太郎, 荒木 雄也, 安藤 史顕, 頼 建光, 佐々木 成, 内田 信一
  • Organizer: 第 58 回日本腎臓学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • Year and Date: 2015-09-05 – 2015-09-05
• [Presentation] WNK キナーゼ分解を介した新たな塩分感受性制御機構. (2015)
  • Author(s): 蘇原映誠
  • Organizer: 第 40 回関東腎研究会
  • Place of Presentation: クラブ関東(東京都、東京)
  • Year and Date: 2015-07-25 – 2015-07-25
  • Invited
• [Presentation] Cullin3 変異を持つ偽性低アルドステロン症 II 型(PHAII)モデルマウスの作製. (2015)
  • Author(s): 荒木雄也, 井上佑一, 森崇寧, 磯部清志, 菊池絵梨子, 佐々木成, 蘇原映誠, 頼建光, 内田 信一
  • Organizer: 第 58 回日本腎臓学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • Year and Date: 2015-06-05 – 2015-06-07
• [Remarks] 東京医科歯科大学 腎臓内科学 ホームページ
  • URL: http://www.tmd.ac.jp/grad/kid/index.html