2014 Fiscal Year Research-status Report
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26670445
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| Research Institution | Yokohama City University |
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Principal Investigator |
田中 章景 横浜市立大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30378012)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
土井 宏 横浜市立大学, 医学部, 講師 (10326035)
児矢野 繁 横浜市立大学, 医学部, 准教授 (50315818)
多田 美紀子 横浜市立大学, 附属病院, 助教 (30722467)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | ポリグルタミン病 / RNA結合タンパク / 核内封入体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はハンチンチンエクソン1とEGFPの融合タンパクを薬剤誘導性に発現する安定細胞株HD16Q-NLS、HD60Q-NLS、HD150Q-NLSを樹立している。異常延長したポリグルタミン鎖(HD60Q-NLS、HD150Q-NLS)をこの細胞に発現させると、FUS/TLSなど既発表のものに加えてPCBP1など未発表のRNA結合タンパクを核内凝集体にトラップしながら細胞死をきたしてくる。そこで、本年度はこれらRNA結合タンパクがポリグルタミン病患者剖検例において実際に核内封入体において認められるのかどうかを検証した。抗ポリグルタミン抗体（1C2, monoclonal）で橋核に核内封入体を確認したポリグルタミン病（SCA1, SCA3, DRPLA）患者剖検脳のホルマリン固定、パラフィン包埋切片（橋）を用いて免疫組織科学的検討を行った。この結果、抗PCBP1抗体(rabbit polyclonal)では、ポリグルタミン病例の核に淡い染色性を認めたが、核内封入体における染色性は認められなかった。また、同じファミリーであるPCBP2、PCBP3についても抗PCBP2抗体（mouse monoclonal）、抗PCBP3抗体（rabbit polyclonal）を用いて染色を行ったが、核内封入体における染色性は認められなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
ポリグルタミン病培養細胞モデルにおいて、核内封入体にとりこまれることを明らかにしているRNA結合タンパクのうちPCBP1、さらに同じファミリーのPCBP1、PCBP2は、予想に反してポリグルタミン病患者剖検脳においては核内封入体への取り込みを認めなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
われわれは、PCBP1以外にもポリグルタミン病培養細胞モデルにおいて、核内封入体にとりこまれるRNA結合タンパクを多数同定している。そこで、これらについても剖検例の核内封入体における染色性を確認し、その後の解析を進める。
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| Causes of Carryover |
ポリグルタミン病培養細胞モデルにおいて、核内封入体にとりこまれることを明らかにしているRNA結合タンパクのうちPCBP1、さらに同じファミリーのPCBP1、PCBP2が、当初の予想に反してポリグルタミン病患者剖検脳においては核内封入体への取り込みを認めなかったことより、当初に予定していた実験の実施が遅れたため，繰越額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
新たな分子の免疫染色、分子生物学的解析のための各種消耗品、学会発表のための旅費などに使用予定である。
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[Journal Article] Late-onset spastic ataxia phenotype in a patient with a homozygous DDHD2 mutation2014
Author(s)
Doi H, Ushiyama M, Baba T, Tani K, Shiina M, Ogata K, Miyatake S, Yuzawa YF, Tsuji S, Nakashima M, Tsurusaki Y, Miyake N, Saitsu H, Ikeda S, Tanaka F, Matsumoto N, Yoshida K
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Journal Title
Sci Rep
Volume: 4
Pages: 7132(1-7)
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Schwann cell involvement in the peripheral neuropathy of spinocerebellar ataxia type 32014
Author(s)
Suga N, Katsuno M, Koike H, Banno H, Suzuki K, Hashizume A, Mano T, Iijima M, Kawagashira Y, Hirayama M, Nakamura T, Watanabe H, Tanaka F, Sobue G
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Journal Title
Neuropathol Appl Neurobiol
Volume: 40
Pages: 628-639
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Analysis of major amyotrophic lateral sclerosis genes in Japan2014
Author(s)
Nakamura R, Sone J, Atsuta N, Watanabe H, Hirakawa A, Watanabe H, Ito M, Senda J, Katsuno K, Tanaka F, Izumi Y, Morita M, Ogaki K, Taniguchi A, Aiba A, Mizoguchi K, Okamoto K, Hasegawa K, Aoki M, Kawata A, Abe K, Oda M, Konagaya M, Imai T, Nakagawa M, Tsuji S, Kaji R, Nakano I, Sobue G
Organizer
64th Annual Meeting of the American Society of Human Genetics
Place of Presentation
San Diego Convention Center, San Diego, CA, USA
Year and Date
2014-10-18 – 2014-10-22
