2014 Fiscal Year Research-status Report
マイクロRNAとタンパクの網羅的解析による熱性けいれんに関する分子生化学的研究
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26670497
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
竹内 義博 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (80188169)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
成田 努 滋賀医科大学, 医学部, 客員助教 (10591836)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 熱性けいれん / miRNA / 遺伝子解析 / MAS解析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
患者および保護者に研究についてのインフォームドコンセントを行った上で熱性けいれん症例の解析を行っている。これまで患者80例の末梢血を採取し解析を行っている。
１）熱性けいれん患者における末梢血タンパク成分の解析：患者末梢血より遠心分離により血漿成分を分離している。血漿タンパクの二次元電気泳動し、タンパク成分をナイロンメンブレンに転写したのち、タンパクを染色し特異低に増加するタンパクスポットの検討を行った。患者の血漿タンパク泳動パターンより、発症時に特異的に変化するタンパクスポットについてMAS解析を行った。この結果をもとに、熱性けいれんに特異的に増加する候補タンパクの同定を行っている。
２）熱性けいれん患者におけるmiRNA発現パターンの解析：採取した末梢血よりnirvana PARIS Kitを用いてtotal RNAを抽出し、Megaplex human poolによりmiRNAの逆転写を行った上で、human pool A primerを用いてreal time PCRを行った。その後、miRNA array解析では、熱性けいれん患者で特異的に変化するmiRNA候補を検索している。現在のところ、変化するmiRNAの傾向は把握できているが、まだ、病因にたどり着くmiRNAの同定には至っていない。
熱性けいれん患者の末梢血における、タンパク成分の変化とmiRNAの発現パターンの変化の両方向からの解析により、熱性けいれん発症時の引き金（病因）と結びつく成分の同定を試みている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
症例の確保に時間がかかっているため、計画のやや遅れがみられている。
熱性けいれん症例は、救急での対応が多く、発症時の受診の現場では本研究への同意取得を行える環境（時間や家族の受け入れ）に制限があり、必ず再診され、研究に導ける訳ではない。
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| Strategy for Future Research Activity |
積極的な症例のリクルートをおこない、解析予定の症例を確保する。
熱性けいれんによる患児受診時に研究への参加の同意取得とできなくとも、必ず再診していただき、熱性けいれんについての診療を行い、研究への参加をしていただく環境整備を行う。そのため、インフォームドコンセントを行うための資料を作成し、多くの症例の解析を行えるシステムを構築する、
また、特異的に増加するタンパクスポットのMAS解析により、熱性けいれんで特異的に増加する候補タンパクのを絞り込み、siRNAによる、熱性けいれん誘発の候補遺伝子の解析をすすめ、研究期間内で候補遺伝子の同定を行う。
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Research Products
(2 results)
