2015 Fiscal Year Annual Research Report
転写因子LMO1が制御するmicroRNAの同定による神経芽腫治療標的分子の探索
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26670510
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| Research Institution | National Cancer Center Japan |
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Principal Investigator |
佐伯 宣久 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 主任研究員 (80466200)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 神経芽腫 / がん遺伝子 / 転写調節因子 / 治療標的分子 / microRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
先行研究において、LMO1遺伝子のコピー数の増加は予後の悪い高リスク群症例に多く見られ、同遺伝子がコードする転写調節因子LMO1は神経芽腫細胞の細胞増殖を促進する機能を持つがん遺伝子であることが明らかになっている。先行研究で実施したクロマチン免疫沈降―DNAシークエンシングにより、神経芽腫細胞SK-N-SHのゲノム上にLMO1の結合領域候補が相当数同定されていたが、本研究における解析の結果、その中に近傍にmicroRNA遺伝子が存在する結合領域候補が5か所あった。しかしながら、26年度の研究において、これら5か所の近傍にあるmicroRNAの中にはLMO1の細胞増殖促進機能を媒介するものはないとの結論に達した。そこで、LMO1発現抑制下でのSK-N-SH細胞のマイクロアレイ遺伝子発現解析により、LMO1の結合領域には存在していないが他の何らかの遺伝子を介して間接的にLMO1による発現抑制を受けているmicroRNAが複数同定されたことから、27年度はこれらのmicroRNAについて解析を行った。マイクロアレイ発現解析の結果をさらに定量PCRにより確認した結果、18個のmicroRNAについて間接的にLMO1による発現抑制を受けているとの結論を得た。これらのmicroRNAを疑似した合成RNA (microRNA mimic)を神経芽腫培養細胞に導入したところ、hsa-miR-34a-5p、 hsa-let-7a-5p、 hsa-let-7b-5p、 hsa-let-7c、hsa-let-7e-5p、 hsa-let-7f-5p、 hsa-let-7g-5p 、hsa-let-7i-5p、hsa-miR-16-5p、 hsa-miR-20b-5p 及びhsa-miR-409-3pが細胞増殖を抑制することがわかった。以上の結果より、がん促進的遺伝子の発現を正に制御することに加えて、細胞増殖抑制機能を持つこれらのmicroRNAの発現を負に制御することにより、LMO1はがん促進的に機能する可能性が示唆された。
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