肉腫や癌浸潤の細胞運動におけるContact Inibition喪失の分子機構

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26670677
• Research Institution: Research Institute, Osaka Medical Center for Cancer and Cardiovascular Disaeses
• Principal Investigator: 高橋 克仁 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立成人病センター(研究所), その他部局等, その他 (40211338)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山村 倫子 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立成人病センター(研究所), その他部局等, その他 (50342994)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2015-03-31
• Keywords: カルポニン / 上皮間葉系転換

Outline of Annual Research Achievements

ヒト乳癌組織マイクロアレーおよび中皮に由来する悪性腫瘍である線維形成性小円形細胞腫瘍(DSRCT)と悪性中皮腫腫瘍組織の免疫組織化学を検討したところ、乳癌では50症例中30％にCnn2の発現を認め、予後の悪いtriple negativeやhigh gradeの症例に多く発現する傾向が認められた。ヒト前立腺癌組織マイクロアレーでは、骨転移腫瘍でCnn2の発現が低下していた。また、ヒトDSRCTと悪性中皮腫組織では調べたすべての症例でCnn2は極めて高い発現を示した。Cytoo社製の1D motility assay chipと位相差顕微鏡タイムラプスビデオ撮影の技術を用いて、マウスCnn1欠失血管平滑筋細胞とヒト明細胞肉腫細胞の系で、1D-Collision Assayを評価する実験系を確立した。マウスCnn2遺伝子のプロモーターは転写開始点の上流68bpの位置に種を超えて保存されたSRFの結合配列であるCArG Box（CCTTATAAGG）をもつことがわかった。さらにマウスCnn2遺伝子のプロモーター解析から転写開始点の上流でCArG Boxを含む188bpがCnn2の発現に必須であることもわかった。また、この領域を含む転写開始点の上流239bpがマウスとヒトで最もよく保存されていた。EMTに伴う発現誘導に必要な最少のプロモーター領域を決定するため、ヒトCnn2プロモーターを人工合成し、LuciferaseまたはEGFP標識遺伝子の上流に連結した発現ベクターを構築した。

Research Products

• [Presentation] Clinical evaluation and treatment of leiomyosarcoma. (2014)
  • Author(s): K.Takahashi, H. Yamamura, Y. Koike, H. Narahara, Y. Ooyama, S. Toyooka, R. Hatae, Y. Ono, J. Yashima, S. Teraoka
  • Organizer: The Japan-United States International Workshop for Sarcoma Research and Therapy
  • Place of Presentation: Honolulu
  • Year and Date: 2014-12-04 – 2014-12-05
  • Invited
• [Presentation] Pazopanib for metastatic soft tissue sarcoma (STS) with or without denosumab. (2014)
  • Author(s): H. Narahara, K. Yasuda, K. Morita, N. Dan, R. Takeda, Y. Takeda, K. Yanagawa, J. Fukushima, H. Matsumoto, K. Matsunaga, S. Ueda, Y. Yasunaga, Y. Inui, S. Kawata, H. Yamamura, K. Takahashi.
  • Organizer: The 39th Annual Meeting of The European Society of Medical Oncology (ESMO)
  • Place of Presentation: Madrid
  • Year and Date: 2014-09-26 – 2014-09-30
• [Presentation] Efficient Formation and Characterization of 3D-Multicellular Tumor Spheroids of Soft Tissue Sarcomas. (2014)
  • Author(s): H. Yamamura, J. Yashima, S. Teraoka, Y. Ono, K. Kodama, Y. Tomita and K. Takahashi.
  • Organizer: 73rd Annual Meeting of The Japanese Cancer Association
  • Place of Presentation: Yokohama
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] 稀少がん肉腫の新治療戦略；水平分業型治療連携とパゾパニブ血管新生阻害剤による分子標的治療 (2014)
  • Author(s): 高橋克仁
  • Organizer: 第５２回日本癌治療学会学術集会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-08-29 – 2014-08-29
  • Invited
• [Presentation] High Throughput and Efficient Formation of 3D-Multicellular Tumor Spheroids of Soft Tissue Sarcomas; Implications for Silencing Mechanisms of Pathogenic Fusion Gene Expression. (2014)
  • Author(s): H. Yamamura, Y. Ono, J. Yashima, S. Teraoka and K. Takahashi.
  • Organizer: 52nd Annual Meeting of The Japan Society of Clinical Oncology
  • Place of Presentation: Yokohama
  • Year and Date: 2014-08-28 – 2014-08-28
• [Presentation] Systemic chemotherapy of pazopanib for advanced soft tissue sarcoma (STS) with or without denosumab. (2014)
  • Author(s): H. Narahatra, K. Yasuda, K. Morita, N. Dan, R. Takeda, Y. Takeda, K. Yanagawa, J. Fukushima, H. Matsumoto, K. Matsunaga, S. Ueda, Y. Yasunaga, Y. Inui, S. Kawata, H. Yamamura, K. Takahashi.
  • Organizer: The 12th Annual Meeting of Japanese Society of Medical Oncology
  • Place of Presentation: Fukuoka
  • Year and Date: 2014-07-17 – 2014-07-17