2015 Fiscal Year Annual Research Report
ライブラリースクリーニングを用いたCRPCに対する新規創薬標的分子の探索
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26670700
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
中村 英二郎 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90293878)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
室伏 善照 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (50448578)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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Keywords | CRPC / Androgen |
Outline of Annual Research Achievements |
平成26年度にCellecta 社の Pooled Lentiviral shRNA Librariesを LNCaP 細胞にInfectionを行い、Puromycin で selection を行った後に CSFBS 下(アンドロゲン非存在下)での培養を開始した。平成27年度に、同条件下において増殖を来したクローン(shRNAの発現によりアンドロゲン非依存性増殖能を獲得した細胞)をpick up することに成功し、genomic DNAを抽出、 Integrate されたshRNA 配列をPCR 法により回収した後にIn-Fusion 法にてlibrary のbackbone plasmidに再導入を行った。回収された plasmid を LNCaP 細胞に再度 Infection を行い、CSFBS 下での細胞増殖能の確認を行った(2次スクリーニング)ところ、複数のクローンにおいて、実験の再現性が確認された。これらのクローンに関して、ELSAによるPSAの産生、WBによるARの発現確認を行った。
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Research Products
(2 results)
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[Journal Article] Role of IL13RA2 in Sunitinib Resistance in Clear Cell Renal Cell Carcinoma.2015
Author(s)
Shibasaki N, Yamasaki T, Kanno T, Arakaki R, Sakamoto H, Utsunomiya N, Inoue T, Tsuruyama T, E Nakamura, Ogawa O, and Kamba T.
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Journal Title
PLoS One
Volume: 10
Pages: e0130980
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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