ヒトiPS細胞由来の血管構成細胞を用いたらせん動脈リモデリング機序の解明

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26670720
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 近藤 英治 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (10544950)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 最上 晴太 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40378766) ; 小西 郁生 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (90192062)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: ヒトiPS細胞 / 血管内皮細胞 / 不死化EVT / 妊娠高血圧症候群 / 母体子宮らせん動脈リモデリング不全

Outline of Annual Research Achievements

１、研究成果　ヒトiPS細胞由来の血管内皮細胞と不死化EVTの共培養における遺伝子発現変化について
ヒトiPS細胞由来の血管内皮細胞と不死化EVTを接触条件下で24時間培養し、それぞれの細胞をフローサイトメーターで分別・回収した。ヒトiPS細胞由来の血管内皮細胞の単独培養では生細胞が79.7%であったのに対し、共培養中のヒトiPS細胞由来の血管内皮細胞の生細胞は49.7％と減少傾向にあった。また、ヒトiPS細胞由来の血管内皮細胞の単独培養ではCD144陽性細胞が69.8%であったのに対し、共培養中のヒトiPS細胞由来の血管内皮細胞のうちCD144陽性細胞は37.0％と減少傾向にあった。ヒトiPS細胞由来の血管内皮細胞は不死化EVTとの共培養により、単独で培養した場合と比較し、生細胞率、CD144陽性率ともに減少しており、不死化EVTとの接触により血管内皮としての性質が減じていく可能性が考えられた。この現象は、妊娠高血圧症候群の起源と推定されている妊娠初期のEVT による母体子宮らせん動脈の置換 (リモデリング)不全と関係があることが示唆される。

２、今後の展望
ヒトiPS細胞由来の血管内皮細胞と不死化EVTを共培養し、それぞれの細胞をフローサイトメーターを用い分離回収し、mRNAを抽出する。DNAマイクロアレイ解析を行ったのち、ssGSEAを行い、血管内皮細胞/壁細胞と不死化EVTの相互作用により生じる細胞内シグナル伝達の変化を検討する予定である。また、ヒトiPS細胞由来血管内皮細胞と不死化EVTを接触共培養後、インキュベーターと蛍光顕微鏡が一体化したタイムラプスイメージングシステムを用い、相互作用により生じる細胞の動きや形態変化を検討する予定である。