Analysis of the pathogenesis of endometriosis focusing on intracellular communications.

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26670725
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 澤田 健二郎 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00452392)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: エクソソーム / 腹膜中皮細胞 / CD44 / 上皮間葉移行 / 細胞間情報伝達

Outline of Annual Research Achievements

子宮内膜症は生殖年齢女性の約10％に発生するCommon disease であり、その克服は女性の生活の質（QOL）に留まらず、少子高齢化に悩む我が国の社会に重大な意義をもつ。今回の研究では、子宮内膜細胞が腹腔内に逆流する際に卵管上皮や腹膜中皮細胞と接触する過程で、これらの細胞からの情報伝達を受けて、いわゆる“子宮内膜症細胞”に進化するのではないかとの仮説のもとに、その情報伝達が細胞より放出される小胞体の一つであるエクソソームを介してなされると考え、細胞分泌型のエクソソームの伝達機構の解明を行った。研究計画通り、超遠心法で初代培養した腹膜中皮細胞でのエクソソームの抽出を行ったが、細胞数の問題もあり、初代培養からの安定した抽出は困難であった。そこで、まずはがん細胞からの安定したエクソソームの抽出に切り替えて、漿液性卵巣癌細胞株HeyA-8およびTYK-nu そしてコントロールとして不死化した正常卵巣上皮細胞（IOSE）を用いてエクソソームを抽出した。超遠心法により、1x10８個の卵巣癌細胞から、50μg程度のエクソソームを抽出することができた。さらにその機能解析を行うべく、初代培養した腹膜中皮細胞への添加実験を行った。エクソソームを蛍光色素であるPKH67 (Sigma)で標識し、蛍光顕微鏡でエクソソームの腹膜中皮細胞への取り込みを確認した。さらに細胞の形態を観察したところ、もともと敷石上の腹膜中皮細胞が、紡錘状に変化していた。そこで詳細な解析を加え、エクソソームにCD44が含まれること、腹膜中皮細胞にそのCD44が伝達されること、それにより、腹膜中皮細胞の上皮間葉移行が起こっていることを確認した。すわなち、エクソソームが細胞間の情報伝達の鍵となっているその一つのメカニズムを解明した。

Research Products

• [Journal Article] Exosomes Promote Ovarian Cancer Cell Invasion through Transfer of CD44 to Peritoneal Mesothelial Cells. (2017)
  • Author(s): Nakamura, K. Sawada, K. Kinose, Y. Yoshimura, A. Toda, A. Nakatsuka, E. Hashimoto, K. Mabuchi, S. Morishige, KI. Kurachi, H. Lengyel, E. Kimura, T.
  • Journal Title: Mol Cancer Res Volume: 15(1) Pages: 78-92
  • DOI: 10.1158/1541-7786.MCR-16-0191
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Is the exosome a potential target for cancer immunotherapy? (2017)
  • Author(s): Yoshimura, A. Sawada, K. Kimura, T.
  • Journal Title: Ann Transl Med Volume: 5(5) Pages: 117
  • DOI: 10.21037/atm.2017.01.47
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Clinical relevance of circulating cell-free microRNAs in ovarian cancer. (2016)
  • Author(s): Nakamura, K. Sawada, K. Yoshimura, A. Kinose, Y. Nakatsuka, E. Kimura, T.
  • Journal Title: Mol Cancer Volume: 24;15(1) Pages: 48
  • DOI: 10.1186/s12943-016-0536-0
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] The Novel IκB Kinase β Inhibitor, IMD-0560, Has Potent Therapeutic Efficacy in Ovarian Cancer Xenograft ModelMice. (2016)
  • Author(s): Sawada, I. Hashimoto, K. Sawada, K. Kinose, Y. Nakamura, K. Toda, A. Nakatsuka, E. Yoshimura, A. Mabuchi, S. Fujikawa, T. Itai, A. Kimura, T.
  • Journal Title: Int J Gynecol Cancer Volume: 26(4) Pages: 610-618
  • DOI: 10.1097/IGC.0000000000000668
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Targeting Inhibitor of κB Kinase β Prevents Inflammation-Induced Preterm Delivery by Inhibiting IL-6 Production from Amniotic Cells. (2016)
  • Author(s): Toda, A. Sawada, K. Fujikawa, T. Wakabayashi, A. Nakamura, K. Sawada, I. Yoshimura, A. Nakatsuka, E. Kinose, Y. Hashimoto, K. Mabuchi, S. Tokuhira, A. Nakayama, M. Itai, A. Kurachi, H. Kimura, T.
  • Journal Title: Am J Pathol Volume: 186(3) Pages: 616-629
  • DOI: 10.1016/j.ajpath
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 婦人科悪性腫瘍治療後の卵巣機能喪失により生じる不定愁訴に対する漢方薬治療の可能性の検討 (2016)
  • Author(s): 吉村明彦 澤田健二郎 笹野智之 小笹勝巳 黒田浩正 中塚えりか 中村幸司 木瀬康人 木村正
  • Organizer: 第31回日本女性医学学会学術集会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 2016-11-05 – 2016-11-06
• [Presentation] Elevated level of serum miR-99a is correlated with serous epithelial ovarian cancer and can be a potential biomarker. (2016)
  • Author(s): Yoshimura, A. Sawada, K. Nakamura, K. Kinose, Y. Nakatsuka, E. Mabuchi, S. Kimura, T.
  • Organizer: 第75回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2016-10-06 – 2016-10-08
• [Presentation] Elevated level of circulating microRNA-99a correlates with serous epithelial ovarian cancer and can be used as a potential biomarker. (2016)
  • Author(s): Yoshimura, A. Sawada, K. Nakamura, K. Kinose, Y. Nakatsuka, E. Mabuchi, S. Kimura, T.
  • Organizer: 第68回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2016-04-21 – 2016-04-24
• [Presentation] Elevated level of circulating microRNA-99a is correlated with serous epithelial ovarian cancer and can be used as a potential biomarker. (2016)
  • Author(s): Yoshimura, A. Sawada, K. Nakamura, K. Kinose, Y. Nakatsuka, E. Mabuchi, S. Kimura, T.
  • Organizer: AACR Annual Meeting 2016
  • Place of Presentation: New Orleans, Louisiana, USA
  • Year and Date: 2016-04-16 – 2016-04-20
  • Int'l Joint Research