2015 Fiscal Year Annual Research Report
ヒトiPS細胞から安定的に成熟した心室筋細胞を得る基盤技術の開発
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26713028
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
内藤 篤彦 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (10588891)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 細胞・組織 / iPS細胞 / 循環器・高血圧 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
iPS細胞由来心筋細胞を96穴プレートに播種後、心室でより特異的に発現するMLC2vおよび心房筋でより特異的に発現するMLC2aに対する抗体で染色したところ、iPS細胞由来心筋細胞はMLC2vあるいはMLC2aのみで染色される細胞、MLC2vとMLC2aの両方で染色される細胞の3種類に分けることができた。Sigma社から市販されている化合物ライブラリーの中からMLC2vのみで染色される細胞の割合を増加させる化合物をスクリーニングしたところ、濃度依存的にMLC2vの染色強度を増加させると同時にMLC2aの染色強度を減少させる化合物を複数同定した。当該化合物が心室筋化を誘導するメカニズムを解析していたが、事業期間内に終了させることができなかった。
平成26年度までに開発した心筋細胞分化誘導培地および心筋細胞プロトコルを利用することで心筋細胞への分化が容易なクローンでは安定して90%以上の分化効率が得られるが、心筋細胞への分化が困難なクローンでは50~60%程度の分化効率しか得られなかった。また、平成26年度までに開発した技術を利用した心筋細胞精製法ではコストと時間がかかる点が問題であった。そこで、胚様体の中に含まれる心筋細胞が他の細胞よりもやや大型であることに注目し、細胞の沈降速度に応じて細胞を分離することができないか検討したところ、心筋細胞は40mm/hrから70mm/hrの沈降速度を有しており、胚様体から分離した細胞を培養液に浮遊させたままで心筋細胞と非心筋細胞を非常に簡便に分離できることが明らかになった。沈降速度の異なる心筋細胞が示す表現型の違いに関する解析を加えた後に論文化予定である。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Generation of Induced Pluripotent Stem Cells From Patients With Duchenne Muscular Dystrophy and Their Induction to Cardiomyocytes.2016
Author(s)
Hashimoto A, Naito AT, Lee JK, Kitazume-Taneike R, Ito M, Yamaguchi T, Nakata R, Sumida T, Okada K, Nakagawa A, Higo T, Kuramoto Y, Sakai T, Tominaga K, Okinaga T, Kogaki S, Ozono K, Miyagawa S, Sawa Y, Sakata Y, Morita H, Umezawa A, Komuro I.
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Journal Title
Int Heart J.
Volume: 57
Pages: 112-117
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Angiotensin II receptor blockade promotes repair of skeletal muscle through down-regulation of aging-promoting C1q expression.2015
Author(s)
Yabumoto C, Akazawa H, Yamamoto R, Yano M, Kudo-Sakamoto Y, Sumida T, Kamo T, Yagi H, Shimizu Y, Saga-Kamo A, Naito AT, Oka T, Lee JK, Suzuki J, Sakata Y, Uejima E, Komuro I.
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 5
Pages: 14453
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Monocyte-derived extracellular Nampt-dependent biosynthesis of NAD(+) protects the heart against pressure overload.2015
Author(s)
Yano M, Akazawa H, Oka T, Yabumoto C, Kudo-Sakamoto Y, Kamo T, Shimizu Y, Yagi H, Naito AT, Lee JK, Suzuki J, Sakata Y, Komuro I.
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 5
Pages: 15857
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Regeneration of the Cardiac Conduction System by Adipose Tissue-Derived Stem Cells.2015
Author(s)
Takahashi T, Nagai T, Kanda M, Liu ML, Kondo N, Naito AT, Ogura T, Nakaya H, Lee JK, Komuro I, Kobayashi Y.
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Journal Title
Circ J.
Volume: 79
Pages: 2703-2712
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Wnt/β-Catenin Signaling Contributes to Skeletal Myopathy in Heart Failure via Direct Interaction With Forkhead Box O.2015
Author(s)
Okada K, Naito AT, Higo T, Nakagawa A, Shibamoto M, Sakai T, Hashimoto A, Kuramoto Y, Sumida T, Nomura S, Ito M, Yamaguchi T, Oka T, Akazawa H, Lee JK, Morimoto S, Sakata Y, Shiojima I, Komuro I.
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Journal Title
Circ Heart Fail.
Volume: 8
Pages: 799-808
DOI
Peer Reviewed
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