2015 Fiscal Year Annual Research Report
大脳皮質ニューロンのサブタイプ依存的な軸索投射機構の解明
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26830027
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
岡 雄一郎 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (30614432)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 神経解剖学 / 神経回路網 / 神経発生・分化 / 分子神経生物学 / 大脳皮質 / 脳梁 / ニューロン・サブタイプ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、大脳皮質に存在する多様なニューロンが各々のサブタイプに応じて特徴的な神経回路を形成する機構、特に同じ領野の同じ層に混在しながら異なる神経回路を形成する連合ニューロンと交連ニューロンの軸索投射機構を明らかにすることを目的とする。マウス大脳皮質1次体性感覚野(S1)に存在する連合ニューロン(1次運動野M1に投射する)と交連ニューロン(対側のS1に投射する)の遺伝子発現をDNAマイクロアレイ解析により比較し、既に得られていた連合ニューロン特異的プロモータの候補遺伝子に加えて、昨年度は交連ニューロン特異的プロモータのための18の候補遺伝子について大脳皮質切片に対するin situハイブリダイゼーション(ISH)を行った。今年度は、ISHでシグナルが得られたものについて、対側S1からの逆行性トレーシングとISHとの2重標識実験を行ったが、明確に2重陽性となるものは得られなかった。現在もスクリーニングを継続している。また、M1と対側S1の両方に投射するニューロンにCreを発現させ、pCAG-loxP-stop-loxP-Lyn-GFPにより両方の回路を同時に標識する系の構築を並行して行った。これを用いてLyn-GFPと同時にLmo4を強制発現させるニューロンサブタイプの変換実験を行い、軸索投射パターンの変化の有無を検証したが、GFPのみを発現させたコントロールと比べて明瞭な差異は検出できなかった。一方、軸索の正確なトレースにはニューロンを疎らに標識する必要があるが、Cre/loxPによる低頻度標識では細胞間でGFPの発現量がばらつくという課題があった。これを克服するため、すべてのCre陽性細胞でGFPの高発現を得るための独自のシステムを開発した。今後、このシステムにより、スクリーニングで得られる特異的プロモータによる回路の可視化が効率的に行えるようになると期待される。
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[Journal Article] Filamin A interacting protein plays a role for proper positioning of callosal projection neurons in the cortex.2016
Author(s)
Yagi, H., Oka, Y., Komada, M., Xie, M.J., Noguchi, K., Sato, M.
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Journal Title
Neurosci. Lett.
Volume: 26;612
Pages: 18-24
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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