Optineurin変異によるALS発症メカニズムの分子基盤の解明

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26830035
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 大澤 亮介 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 助教 (20719356)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: Optineurin / ALS / オートファジー

Outline of Annual Research Achievements

Optineurinがオートファジー誘導下で、細胞内の局在をどう変化させるのかについて、ミトコンドリアの脱分極を起こさせる化合物CCCPを投与することで解析を行った。結果、パーキンソン病の原因遺伝子Parkin依存的に誘導されるオートファジー（マイトファジー）の際にミトコンドリア状に誘導されることを明らかにした。さらにそのときの生化学的変化の解析も行い、マイトファジー依存的にoptineurinが分解されることを見いだした。
またALS患者に認められる変異を導入したoptineurinはその細胞局在が正常型と異なっていることも見いだした。
また、実際にALSの際に神経細胞死をおこす際にOptineurinがどのように関わっているのかを明らかにする為に分化誘導した神経細胞株でOptineurinの局在を調べたところ、細胞体だけでなく軸索、軸索先端部にもoptineurinが局在していることが明らかになった。今後神経細胞でのオートファジー誘導時にoptineurinの局在がどのように変化するのかを明らかにする。
また、マウスの海馬ニューロンの初代培養の系の確立に成功したので、Optineurinノックアウトマウスから採取した初代培養のニューロンでオートファジー誘導時におこる変化を明らかにする予定である。
また、神経細胞死に深く関わるとされるミクログリアに関しても機能異常がないかを調べる為に、ミクログリアの初代培養の系を確立した。また、ミクログリアの細胞株BV2でoptineurinのノックダウンしたものも作成した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

オートファジー誘導下でのoptineurinの局在変化、分解などに関して計画通り解析が進んでいる。

Strategy for Future Research Activity

現在ALS型変異を導入したマウスを維持、繁殖中であり、そのマウスを使用した解析も今後平行して行っていき、培養株と初代培養の実験系の双方でoptineurinの機能解析をすすめていく。