2015 Fiscal Year Annual Research Report
EMTを制御する新規DNA認識化合物によるヒトiPS細胞誘導の高効率化
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26830134
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
齋藤 孝輔 日本大学, 医学部, 研究員 (80624163)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | EMT / iPS / PIポリアミド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、導入効率が非常に高く、デリバリー試薬なしに生体に安定に取り込まれる新規DNA認識化合物PIポリアミドを用いて、短期間且つ高い誘導効率を望めるヒトiPS細胞樹立法を開発することである。
ヒトTGF-β2、ヒトTGF-β１レセプター、ヒトTGF-β2レセプター遺伝子のプロモーターに対する特異的PIポリアミドを設計、合成し、それら作製したPIポリアミドのDNA結合能、細胞核内導入効率、細胞毒性、EMTに対する抑制効果を評価、検討した。しかしながら、それら作製したPIポリアミドはEMT抑制能を示さなかった。既にEMT抑制能を有することが証明されたヒトTGF-β１のPIポリアミドをゲノムへの組換えがないセンダイウイルスによりリプログラミング因子を導入したヒト繊維芽細胞に投与し、ヒトiPS細胞の誘導効率を試みたところ、非投与群に比べPIポリアミド投与群のアルカリフォスファターゼ陽性コロニー数の有意な増加が認められ、またそれらのコロニーは未分化マーカーの発現が認められた。作製されたiPSコロニーのヒト胚葉性幹細胞の多分化能と自己増幅能に関連する一群のマイクロアレイ解析を行った結果、TGFβ1PIポリアミドを投与すると、その遺伝子プロファイルにおいて非投与群のiPS細胞と同様の遺伝子発現の挙動を示した。
よって、TGF-βのプロモーター特異的PIポリアミドによりEMT/METを制御でき、ヒトiPS細胞誘導効率を高める事が明らかになった。
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