2016 Fiscal Year Annual Research Report
Development of polypodna based dendritic nano-sized DDS
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26860021
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| Research Institution | Setsunan University |
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Principal Investigator |
毛利 浩太 摂南大学, 薬学部, 助教 (30723697)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | DNA assembly / dendritic structure / CpG motif / macrophage / innate immunity |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、核酸医薬を含む機能性核酸の疾患治療効果の飛躍的な向上を目的に、新規デンドリマー型核酸ナノDDSを創出する。これまでに、デンドリマー型DNA（DL-DNA）を構成する多足型構造を形成するDNA（polypodna）は、マクロファージ様細胞株RAW264.7や樹状細胞株DC2.4に効率的に取り込まれるのに対し、繊維芽細胞株NIH3T3、大動脈内皮細胞株MAEC、卵黄嚢由来内皮細胞株C166には僅かにしか取り込まれないことを見出した。この結果から、polypodnaやDL-DNA構造は、貪食能を有する免疫細胞に効率的に取り込まれたと推察した。また、CpGモチーフを含むpolypodnaは、一本鎖、二本鎖CpG DNAに比べて多量のサイトカイン産生を誘導した。さらに、RAW264.7細胞による取り込み後のサイトカイン産生を評価したところ、polypodnaは、二本鎖CpG DNAに比べて高い免疫活性化能を示した。また、蛍光共鳴エネルギー移動（Fluorescence resonance energy transfer：FRET）を用いた検討から、polypodna構造が、RAW264.7細胞に取り込まれた後に、二本鎖DNAに比べて効率的に一本鎖DNAに乖離することをも見出した。これらの結果から、免疫活性型polypodnaは、免疫細胞に効率的に取り込まれた後、一本鎖DNAに乖離することで免疫活性したと推察した。以上、本研究ではpolypodna構造を基盤としたDL-DNAを酵素反応を用いることなく構築する方法論を開発し、本研究で創出した免疫活性型polypodnaおよびDL-DNAが有用な核酸ナノDDSであることを明らかにした。
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