2015 Fiscal Year Annual Research Report
TICAM-1シグナロソーム構成因子の同定、及び機能解析
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26860033
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
舟見 健児 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任助教 (00421983)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | TICAM-1 / TLR3 / 自然免疫 / インターフェロン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
TICAM-1は自然免疫を誘導するシグナル伝達に重要な役割を果たす細胞内アダプター分子であり、二重鎖RNAを認識したTLR3からのシグナル伝達に際して細胞質に分子集合体を形成する。我々がTICAM-1シグナロソームと命名したこの複合体は、TICAM-1を介した１型インターフェロンや炎症性サイトカインの産生に重要な役割を果している。本研究は、TICAM-1シグナロソームの構成成分を網羅的に分析することで、TICAM-1シグナロソーム形成に関与する分子を探索することを目的とした。
TICAM-1全長、及びシグナロソーム形成が出来ない変異体TICAM-1を培養細胞に発現させ、免疫沈降法によってシグナロソーム構成成分を精製した。マススペクトル法で構成成分の解析を行なった結果、シグナロソームを形成しているTICAM-1全長にのみ特異的に結合する分子を10種類以上同定することができた。
得られた分子のうち、最も強い結合を認めた14-3-3-zetaについて、TICAM-1を介したシグナル伝達に及ぼす影響を解析した。TLR3リガンドからの刺激によってTICAM-1を介して産生が誘導される１型インターフェロンや炎症性サイトカインの産生は、14-3-3-zeta遺伝子のノックダウンによって顕著に減少した。TICAM-1を介したシグナル伝達経路について解析を進めた結果、IkBのリン酸化が14-3-3-zeta遺伝子のノックダウンによって抑制されていた。更に、TICAM-1シグナロソームの形成について生細胞を用いて検討したところ、14-3-3-zetaのノックダウンによってシグナロソーム形成が抑制されていた。これらの結果から14-3-3-zetaは、TICAM-1のシグナロソーム形成に影響を与えることで、下流のシグナル伝達の制御に重要な役割を果すことが明らかとなった。
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