2017 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidation of the effect of HCV propagationa and IFN sensitivity by amino acid substitution in interferon sensitivity-determining region.
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26860309
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
杉山 隆一 国立感染症研究所, ウイルス第二部, 研究員 (70714476)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | C型肝炎ウイルス / NS5A / インターフェロン / 薬剤感受性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究はC 型慢性肝炎におけるインターフェロン (IFN) 治療効果に関与する C 型肝炎ウイルス (HCV) 非構造領域 (NS) 5Aに存在するIFN感受性規定領域 (ISDR) のアミノ酸置換が、HCVのライフサイクルに与える影響及びその作用機序を解析するとともに、どのような機序でIFN感受性を規定しているかについて明らかにすることを目的としている。
培養細胞で効率良く複製が可能なHCV株は遺伝子型2aのJFH-1株のみであることから、JFH-1株のNS5Aを、遺伝子型1bであるCon1株由来のNS5Aに置換した組換えウイルス (JFH1/5ACon1) とJFH1/5ACon1株のNS5A内のISDRに7つのアミノ酸置換を持つJFH1/5ACon1/i-7mutを構築した。これらの株のHCV-RNAを細胞に導入した結果、HCVのウイルス粒子産生において重要であるNS5Aとcoreタンパク質との相互作用が、ISDRにアミノ酸置換を有するウイルスでは減少しており、その結果、感染性ウイルス粒子産生の効率を低下した。
また、構築した組換えウイルスを導入した細胞で、IFN-αの添加によるインターフェロン誘導遺伝子 (ISGs) 発現を評価した結果、ISDRにアミノ酸置換のあるウイルスではIFN-αの添加によりISGsの発現が有意に上昇したが，ISDRにアミノ酸置換のないウイルスではISGs発現が抑制されていた。この現象について詳細に検討した結果、ISDRにアミノ酸置換のないウイルスでは、NS5AがSTAT1と結合することで、STAT1リン酸化の亢進が抑制されたのに対して、ISDRにアミノ酸置換があるウイルスでは、この現象はほとんど見られなかった。
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