2015 Fiscal Year Research-status Report
ヒトパピローマウイルスの増殖期における相同組換えを利用したDNA複製機構の解明
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26860310
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
松尾 理加 (楠本理加) 名古屋大学, 環境医学研究所, 助教 (90514133)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | HPV / DNA複製 / DNA組換え |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ゲノムのDNA複製装置が損傷DNAに遭遇した場合、複製装置のPCNA（増殖細胞核抗原）のK164がユビキチン化される。モノユビキチン化された場合には損傷乗り越え複製DNAポリメラーゼがリクルートされ、損傷DNAに対してDNA合成が行われる。ポリユビキチン化された場合には相同組換え反応により損傷のないDNAを鋳型にDNA合成が行われる。HPV DNAの増殖複製においてもユビキチンを介して組換え反応を利用するようなメカニズムがあるのではないかと考えた。HPV DNAの複製に必須のHPV E1ヘリカーゼはユビキチン化され、HPV DNA複製に影響を与える。HPVのユビキチンリガーゼを探索する目的で様々なユビキチンリガーゼをノックダウンし、細胞内でのHPV複製効率を測定した。また、PCNAのユビキチン化酵素であるRad18を精製し、HPVタンパク質との相互作用を検討中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
Wee1ノックダウンによりE1のタンパク質量が減少する。このことから、Wee1はE1と結合し安定化すると考えていた。しかし、Wee1ノックダウンによりE1を分解するタンパク質複合体であるAPCを活性化することがわかった。このことから、Wee1ノックダウンによる効果がE1との結合がなくなったことによるものか、単にAPCによる分解が促進したものか区別ができなくなった。また、E1とWee1の精製タンパク質同士の結合は検出できるものの、細胞内での結合が検出できない。
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| Strategy for Future Research Activity |
新たにE1ユビキチン化酵素を検索することにした。
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| Causes of Carryover |
学会に出席しなかった。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
物品費としてsiRNAの購入に充てる。
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Research Products
(3 results)
