2014 Fiscal Year Research-status Report
カベオラ構成蛋白Cavinファミリーの機能解析による肺高血圧発症機序の解明
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26860579
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
中西 直彦 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10637911)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 肺高血圧症 / カベオラ / カベオリン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
肺動脈性肺高血圧症 (PAH) 患者において細胞膜カベオラ構成タンパクであるCaveolin-1の遺伝子変異が報告され、遺伝性PAHの原因遺伝子の一つとして位置付けられた。Caveolinとともにカベオラを構成しているCavinファミリーもカベオラ構造に必須のタンパクであり、我々はCavin-4/MURCが肺高血圧症の発症・発展に重要な役割を果たしていることを報告している（論文投稿中）。またCavin-1/PTRFのノックアウトマウスで肺高血圧症が起こることが報告された (Sward et al. Physiol Rep 2013)。CavinファミリーとCaveolinファミリーは複合体を形成しているので、我々はCavin-2/SDPRの肺高血圧症発症における役割を検討した。
Cre-loxPシステムを用いて、我々はCavin-2/SDPR全身ノックアウトマウスを作製した。このCavin-2/SDPRノックアウトマウスを用いて低酸素負荷肺高血圧症モデルを作成した。10%酸素4週間の負荷後に右室圧の測定を行い、Cavin-2/SDPRノックアウトマウスではwild typeマウスを比較して右室収縮期圧の上昇および右室肥大が認められることを明らかにした。wild typeマウスで低酸素負荷肺高血圧症モデルを作成すると肺におけるCavin-2/SDPRとCaveolin-3のmRNA発現が増加していたが、Cavin-2/SDPRノックアウトマウスでは低酸素負荷によるCaveolin-3のmRNA発現増加が抑制されている傾向を明らかにした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Cavin-2/SDPRの全身ノックアウトマウスでは低酸素負荷による肺高血圧症増悪が認められることを明らかにしたが、その機序に関してはまだ十分に解明できていないため。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在、CRISPR/CAS9システムを利用しヒト肺動脈内皮細胞とヒト肺動脈平滑筋細胞でCavin-2/SDPRをノックアウトした細胞を作成しており、これらの細胞を用いてNOSやMAPKの活性を検討し、Cavin-2/SDPRによる肺高血圧症発症・進展の分子機構を検討する。
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| Causes of Carryover |
ノックアウトマウスの作成にかかる費用が軽減されたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
現在CRISPR/Cas9を入れたLenti virusを作成しており、それの作成と細胞実験における費用に使用する。また今後、平滑筋特異的ノックアウトマウスや内皮特異的ノックアウトマウスを作成予定であり、その費用に使用する。
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Research Products
(4 results)
