C57BL/6背景のSKGマウスを用いたSLEの疾患モデルの構築

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26860749
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 橋本 求 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60512845)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: SLE / 関節リウマチ / T細胞 / 動物モデル / 自然免疫

Outline of Annual Research Achievements

BALB/c背景で関節リウマチに酷似した自己免疫性関節炎を発症するSKGマウス（ZAP70 の点突然変異が責任遺伝子）の遺伝的背景をC57BL/6背景とすることで、ループス腎炎のモデルができるかを検討した。前年度までに、SKBマウスをC57BL/6バッククロスしてC57BL/6背景のSKGマウスを観察したところ、自然の状態では病気が見られなかったが、TLR3(polyI:C), TLR7(Imiquimod), TLR9（CpG）など、ウイルス由来のDNA/RNA刺激を慢性的に加えたところ、C57BL/6背景のSKGマウスにおいてのみ著明な抗DNA抗体産生がみられ、免疫染色によるC3やIgGの沈着から、ループス腎炎の発症が確認された。そのメカニズムとして、poly I:C刺激を受けたC57BL/6背景のSKGマウスでは、自己抗体を産生するgerminal center B細胞（B220+, AA4.1+ Fas+ GL7+）と、自己抗体の産生をヘルプするfollicular helper T細胞（CD4+ CXCR5+ PD-1＋ BLC6+）の細胞分画が、それぞれ増多していることを見出した。他のT細胞分画を比較したとき、Th17細胞やIL-17のmRNAはBALB/c背景のSKGマウスで増多している一方、IL-21やTfhのマスター遺伝子であるBcl6の発現はC57BL/6背景のSKGマウスで増多していた。また、自己免疫を負に抑制するTregの数は、wild typeのBALB/cやC57BL/6マウスに比較してBALB/cおよびC57BL/6背景のSKGマウスにおいてむしろ増加していたが、Foxp3のエピゲノムが不安定でエフェクターに変化しうるとされるCD25陰性のTregが増加しており、自己免疫疾患の発症に関与する可能性が考えられた。C57BL/6背景においてTfhが自然増多する分子メカニズムを解明するために、Tfh分化にかかわるサイトカインや補助刺激因子の発現などにつき、現在、検討を進めている。