2016 Fiscal Year Annual Research Report
The role of L type calcium channel on mast cell in inflammatory disease of skin
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26860901
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Research Institution | Nihon University |
Principal Investigator |
葉山 惟大 日本大学, 医学部, 助教 (40647187)
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Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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Keywords | マスト細胞 / L型カルシウムチャネル / 慢性蕁麻疹 |
Outline of Annual Research Achievements |
現在までにマウスとラットのマスト細胞においてL型カルシウムチャネル(LTCC)が発現し、ロイコトリエン、サイトカインの産生やアポトーシスの抑制に関与することが報告されているが、ヒトマスト細胞におけるLTCCの役割はいまだ不明な点が多い。本研究では主にヒト皮膚マスト細胞におけるLTCCにおける役割を解明し、蕁麻疹を中心としたマスト細胞の関与する疾患における役割を調べた。 まずヒトマスト細胞にLTCCが発現しているかを、LTCCの機能ユニットであるα2δサブユニットに対する抗体を用いて調べた。皮膚マスト細胞は皮膚移植術を行った患者の過剰検体より培養した。その結果、フローサイトメトリーでヒト培養皮膚マスト細胞上にLTCCが発現していることが分かった。皮膚マスト細胞のLTCCの発現を確認するために健常人、アトピー性皮膚炎患者、慢性蕁麻疹患者の皮膚をマスト細胞に特異的に発現するトリプターゼに対する抗体とと前述のα2δサブユニットに対する抗体で蛍光二重染色を行った。その結果、何れの検体もマージされた蛍光が確認されなかった。 ヒト皮膚マスト細胞におけるLTCCの機能を解析するために、培養皮膚マスト細胞を用いて脱顆粒実験を行った。しかしながら1μMのLTCC阻害薬であるニフェジピンは抗FceRI抗体による脱顆粒を阻害しなかった。また塩基球活性化試験を健常人(7例)と慢性蕁麻疹患者(3例)で行った。慢性蕁麻疹患者では健常人と比べると好塩基球の活性化は少なかった(健常人;35.9±9.74%、慢性蕁麻疹;7.02±4.77%)がニフェジピン1μMの添加でも同様のデータ(健常人;37.1±9.88%、慢性蕁麻疹患者;7.22±5.00%)であり、有意差は生じなかった。 以上のデータより培養ヒト皮膚マスト細胞にはLTCCが発現しているものの、生体内でのマスト細胞LTCCの機能は明らかにできなかった。
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