2015 Fiscal Year Annual Research Report
ヒストン制御による肝胆膵領域悪性腫瘍の上皮間葉転換制御と化学療法抵抗性の克服
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26861069
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
阪本 卓也 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (40645074)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 上皮間葉転換 / 化学療法抵抗性 / 胆道癌 / ヒストン制御 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
TGF-βは種々の癌の化学療法抵抗性に関与し、EMTを誘導する代表的因子である。胆道癌におけるTGF-βと化学療法抵抗性、EMTとの関連を明らかにするために、TGF-βのノックダウン実験を行った。qRT-PCRによる親株とゲムシタビン (GEM) 耐性株の比較において、TGF-βは耐性株で高発現がみられた。siRNAを用いてTGF-βをノックダウンすることで、耐性株の化学療法抵抗性が減弱することをMTT assayを用いて確認した。さらに、qRT-PCRの結果から、耐性株においてTGF-βをノックダウンすることで、上皮系マーカーの発現上昇、間葉系マーカーの発現低下を認め、EMTが抑制されることを確認した。これらの結果から、胆道癌においてTGF-βは化学療法抵抗性に重要な役割を持ち、TGF-βの発現を抑制することでEMTおよび化学療法抵抗性の抑制につながる可能性が示唆された。
さらに、前年度に示されたvorinostatのin vitroでのEMTおよび化学療法抵抗性抑制作用について、in vivoでの効果を検討した。胆道癌細胞株であるMzChA-1とGEM耐性株 (MzChA-1_GR) をNOD/SCIDマウスの皮下に注射することで親株とGEM耐性株の皮下腫瘍モデルを作成しGEMと併用することでのvorinostatの効果を検討した。その結果、GEM耐性株の皮下腫瘍モデルにおいて、GEM単剤群と比較してGEM + vorinostat併用群で生存期間の有意な延長を認めた。転移巣の比較では、GEM + vorinostat併用群ではGEM単剤群よりも転移巣のサイズが小さい傾向がみられ、転移が抑制されていると考えられた。GEM耐性株の皮下腫瘍モデルにおいて、増大した皮下腫瘍と転移巣 (肺) の腫瘍組織を採取し、SMAD4の免疫組織化学染色を行ったところ、皮下腫瘍、転移巣共にGEM単剤群では核が強く染色されたのに対し、GEM + vorinostat併用群では核はほとんど染色されなかった。
これらの結果から、vorinosatatは生体においてもSMAD4の核内移行を抑制することで転移を抑制する可能性が示唆された。
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