2015 Fiscal Year Annual Research Report
RANK/RANKL/OPG系を標的とした椎間板変性に対する革新的治療法の開発
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26861184
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
竹上 徳彦 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), その他 (20727664)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 椎間板変性 / RANKL / 炎症性サイトカイン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
腰椎手術時に摘出した変性初期のヒト椎間板組織を用いて、線維輪、髄核に分離し、単層培養を行いました。
1. 免疫組織化学的検討として共焦点レーザー顕微鏡を用いて培養細胞を観察したところ、ヒト椎間板培養細胞は線維輪、髄核ともに、Receptor activator of NF-кB（RANK）は主に細胞膜、RANK Ligand （RANKL）とOsteoprotegerin (OPG)では主に細胞質に発現を認めました。
2. mRNAレベルでの発現量をreal time-PCR法を用いて定量的に評価しました。1) 線維輪、髄核細胞間での発現量の比較、2) 機能解析として、炎症性サイトカイン刺激がRANK/RANKL/OPG 系の発現に与える影響を検討しました。1) mRNAレベルでのRANK/RANKL/OPG 系の発現を確認することができました。RANK、RANKL、OPGともに髄核細胞におけるmRNAレベルでの発現量は線維輪細胞に比べて有意に高値でした。
2) 変性椎間板環境を模倣する目的でInterleukin -1 beta(IL-1β）投与すると、RANKやOPGではmRNAレベルでの発現量は有意な変化を認めませんでした。しかしRANKLの発現量は、線維輪、髄核細胞ともにIL-1β刺激によって有意に上昇しました。
以上より、ヒト椎間板においてもタンパクおよびmRNAレベルでの発現を確認しました。本研究は椎間板でのRANK、RANKL、OPGの発現を１つのシステムとして捉えて確認し、また線維輪、髄核間での比較も行った初めての報告です。ヒト椎間板においても線維輪および髄核細胞は、それぞれがRANK/RANKL/OPG 系の発現を有しており、炎症性サイトカインの刺激はRANK/RANKL/OPG 系の発現を増強させることが判明し、椎間板変性に関与する可能性が示唆されました。
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Research Products
(6 results)
