2014 Fiscal Year Research-status Report
in vivo 蛍光イメージングを利用したHPV感染細胞可視化の試み
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26861321
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| Research Institution | University of Fukui |
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Principal Investigator |
品川 明子 福井大学, 医学部附属病院, 助教 (90444223)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 子宮頸癌 / HPV感染 / 蛍光分子イメージング |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、「HPV感染により癌化した子宮頸部細胞をin vivo蛍光イメージングを応用して可視化すること」である。
本年度は、１．ICGと抗体の蛍光分子イメージングプローブの作製と最適化と、２. HPV感染培養細胞を用いて、抗ICG修飾抗体がEFFRと結合することの確認 の以上2点を研究実施計画としてあげていた。
１に関しては、ICGが抗EGFR抗体と結合し、子宮頸癌組織で機能することは確認できたが、プローブの標識率が最適な状態を、フローサイトメトリーを用いて検証し、抗EGFR抗体：ICG=１：２で標識され最適であると考えられた。現時点では、蛍光分子(ICG)の変更や、抗体（抗EGFR抗体）の変更は不要と考えている。
２に関しては、HPV感染子宮頸癌細胞（Hela細胞）を使い、蛍光抗体法でEGFRが細胞膜に発現しているかどうかを、共焦点レーザー顕微鏡で観察した。結果、細胞膜に点在して存在していると考えられた。「蛍光顕微鏡に冷却CCDカメラを伴ったシステム」を用いて、画像処理システムを併用することにより、より高い解像度とコントラストを得ることができ、きわめて微弱な蛍光も観察可能となるのではないかと考えている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成26年度の研究実施計画である、1.ICGと抗体の蛍光分子イメージングプローブの作製と最適化と、２. HPV感染培養細胞を用いて、抗ICG修飾抗体がEFFRと結合することの確認 の2点は、おおむね予定通り進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後の研究計画として、1. 動物モデルを用いた実験、さらには2. ヒトにおける方法を確立をめざしたい。
1. では、マウスの皮下に、①Hela細胞もしくは②標的蛋白EGFRの発現をsiRNAでノックダウンしたHela細胞を、それぞれインジェクションし腫瘍を形成させる。腫瘍に直接、抗ICG修飾EGFR抗体を添加し、「小動物蛍光画像観察用のIn vivo リアルタイムイメージング装置」を用いて蛍光レベルを解析する。さらには、蛍光レベルと病理組織所見を比較することで、in vivoで抗ICG修飾EGFR抗体が病変の広がりを反映しうるか検討する。
2. では、ヒトにおいての検出器の作製、および蛍光部位の病理学的検討を行いたいと考えている。
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[Presentation] 子宮頸癌の脈管侵襲陽性のみは再発リスク因子となるか－組織型の違いによる検討－2014
Author(s)
品川 明子, 黒川 哲司, 井上 大輔, 太田 可奈子, 杉田 元気, 山本 真, 玉村 千代, 髙橋 仁, 服部 克成, 知野 陽子, 西島 浩二, 福田 真, 折坂 誠, 吉田 好雄
Organizer
第22回福井婦人科腫瘍研究会
Place of Presentation
福井市、ユアーズホテルフクイ
Year and Date
2014-06-18 – 2014-06-18
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