2014 Fiscal Year Research-status Report
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26861327
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| Research Institution | Shimane University |
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Principal Investigator |
折出 亜希 島根大学, 医学部, 助教 (00423278)
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2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | ゴナドトロピン / GnRH / 下垂体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Trichostatin A (TSA) ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤であり、ヒストンからアセチル基を取り除く酵素の活性を妨げることにより遺伝子発現を変化させる目的で広く実験に使用されている。TSAのゴナドトロピンサブユニット発現に対する影響について検討した。ゴナドトロピン産生LβT2細胞をTSAで刺激し、ゴナドトロピンLHβ、FSHβ発現を定量PCRで測定した。またウェスタンブロッティング法によりTSAによるヒストンアセチル化反応、ERK活性化反応を検討し、GnRH刺激との比較を行った。TSAは下垂体ゴナドトローフLβT2細胞において濃度依存的にFSHβサブユニット発現を増加させたが、LHβサブユニットは増加させなかった。GnRH刺激ではFSHβ、LHβサブユニットともに濃度依存的に増加した。TSAによるFSHβサブユニット発現の増加はGnRHとの同時刺激で有意に抑制された。TSAにより細胞内アセチルヒストンは増加したがGnRHで抑制されなかった。またTSAはGnRHと同様に単独でERKを活性化し、TSAとGnRHとの同時刺激でERK活性は更に増加した。TSAはLβT2細胞においてFSHβを特異的に発現させることが分かった。TSAによるFSHβ発現機序はGnRHとは異なるものと考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
特異的ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤であるTrichostatin A(TSA)を用いた実験から、ゴナドトロピン遺伝子発現にヒストンアセチル化が関与する可能性について示すことができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
生殖制御ホルモンの中枢性制御機構の解明として、今後はPACAPをはじめとした視床下部に存在する様々な生理活性物質のGnRHニューロンにおける役割について検討をしていく予定である。GnRH産生ニューロン株としてGT1-7細胞を使用し研究をする他、ラット脳の初代培養を行い検討をすすめて行く予定である。
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