2015 Fiscal Year Annual Research Report
唾液腺上皮および線維芽細胞に着目したIgG4関連疾患の病態解析
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26861401
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
阿部 亜由美 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (80644468)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 細胞・組織 / 上皮バリア / 唾液腺 / 導管上皮細胞 / IgG4関連疾患 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では， IgG4関連涙腺・唾液腺炎（IgG4-DS（のヒト唾液腺および正常のヒト唾液腺の培養細胞，特に導管上皮細胞に着目し研究を行った．正常顎下腺およびIgG4-DS由来顎下腺において，タイト結合関連蛋白であるClaudin-4，-7，Occludin，JAM-Aが 導管上皮の頂端側で認められ，両者の発現に違いは認められなかった．RT-PCR解析，ウェスタンブロット解析においても同様の結果が得られている．培養細胞は各タイト結合関連分子の免疫染色を行うと，正常由来顎下腺導管上皮細胞，IgG4-DS由来 顎下腺導管上皮細胞，いずれにおいてもClaudin-4,7,Occludin,JAM-Aの各種タイト結合関連蛋白が 細胞膜上に発現していた．ヒト顎下腺導管上皮のバリア機能に対し，サイトカインがどのような影響を与えるか調べるため，EGF，TGF-β，IFNγの各サイトカインを処置した培養細胞のTERを測定した．その結果，興味深いことにIFNγ処置においてTERが著明に上昇した．IgG4-DS由来の培養細胞にサイトカインを処置したところ，TGF-β処置でTERは有意に減少し，IFNγ処置でTERが著明に上昇した．Occludinの発現を免疫染色によって解析したところ，TGF－β処置細胞では，細胞膜上のOccludinの発現が低下し，一方IFNγ処置細胞では，Occludinが細胞膜上に安定高発現していた．次にIFNγによるバリア機能増強のメカニズムを探るため，Claudin-7に注目して解析したところ，RT-PCR法およびウェスタンブロット法にて，IFNγ濃度依存性にClaudin-7の発現が上昇することが確認され，これに一致してIFNγ濃度依存性にTERのが有意な上昇を認めた．免疫染色でもIFNγ処置細胞でClaudin-7が細胞膜上に安定して発現していることが示された．
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