2014 Fiscal Year Research-status Report
培養口腔粘膜上皮細胞シート移植後の角膜移植施行における摘出角膜組織の解析
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26861448
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
大家 義則 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20599881)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 再生医学 / 角膜上皮幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
培養口腔粘膜上皮細胞シート移植後の４例の患者において全層もしくは表層角膜移植を施行し、摘出角膜組織を対象として、培養移植後の角膜上皮や実質の組織変化について、HE染色及び免疫染色で検討を行った。
HE染色ではいずれの症例においても上皮層は重層化が認められたが、重層度合いにはばらつきがあり、３例において２層～４層程度であったが、１例においては１０層以上と、口腔粘膜組織に類似していた。細胞形態は基底細胞が表層細胞よりも小さい傾向を認めた。
免疫染色では、いずれの症例においてもp63, K3/76, K4, K13が陽性であった。さらにMUC16が３例で、ZO-1, K12が１例で陽性であった。K15,p75はいずれの症例でも陰性であった。
これらの結果から、培養口腔粘膜上皮細胞は角膜上に移植後も基底部にはp63陽性の幹細胞を含み、K3/76およびK4,K13陽性であることから、培養口腔粘膜上皮細胞は眼表面に移植されて１年以上経過しても、シート移植前のphenotypeを維持していることが示唆された。また１例において、角膜上皮特異的ケラチンであるK12が陽性であり、角膜上皮化成したと考えられた。３例においてはMUC16陽性であることから、角膜上皮様に変化していることが確認された。
来年度においては、当該年度の成果をもとに、これらの患者の涙液中のサイトカイン濃度についての検討も追加で行い、研究を進めることとする。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初予定していた通り、培養口腔粘膜上皮細胞シート移植後の角膜移植症例において、摘出角膜に対して幹細胞機能、上皮細胞のphenotype、上皮細胞の形態、バリア機能について検証を行うことができたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
来年度においては、予定通り涙液中のサイトカイン濃度についても検討を行って、上皮phenotypeとの関連について検討を行い、クラスター解析によってヒートマップを作製して解析を続ける。
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| Causes of Carryover |
来年度には、涙液中のサイトカインの測定および解析を予定しており、消耗品等に費用が掛かることが予定されていることから、平成２６年度経費の一部を平成２７年度経費として使用することとした。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
サイトカイン測定や解析用の消耗品等で使用することとする。
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[Journal Article] Development of a cell sheet transportation technique for regenerative medicine.2014
Author(s)
Oie Y, Nozaki T, Takayanagi H, Hara S, Hayashi R, Takeda S, Mori K, Moriya N, Soma T, Tsujikawa M, Saito K, Nishida K.
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Journal Title
Tissue Eng Part C Methods.
Volume: 20
Pages: 373-82
DOI
Peer Reviewed
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