2015 Fiscal Year Annual Research Report
アラーミンシグナルを介した角膜潰瘍形成の分子機序解明
| Project/Area Number |
26861453
|
|---|
| Research Institution | Yamaguchi University |
|---|
Principal Investigator |
折田 朋子 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50467792)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
|
| Keywords | 感染性角膜腫瘍 / 自然免疫 / コラーゲン分解 / アラーミン分子 / 角膜線維芽細胞 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
平成26年度，角膜上皮細胞，あるいは角膜線維芽細胞を凍結，融解させることでネクローシスを誘導し，そこから細胞抽出液を採取し，アラーミン分子を同定した。さらにアラーミン分子を用いて，NF-kB, MAPKなどのシグナル伝達経路の解析や細胞死，細胞移動や接着に対する作用を検討した。
平成27年度は，同定したアラーミン分子を用い，Ⅰ型コラーゲンにて三次元培養した角膜線維芽細胞と共培養した。培養上清を採取し，限外濾過されたコラーゲン分子よりヒドロキシプロリンを測定し，コラーゲン分解能が有意に促進されていることがわかった。また，コラーゲン分解酵素の一つであるMMPｓの発現を検討したところ，MMP２，３，９で発現上昇がみられた。このことから，アラーミン分子はコラーゲン融解を促進する作用があることが示唆された。
次に角膜上皮細胞のバリアー機能へのアラーミン分子の作用を検討した。まずはTrans Epithelial Resistance:TERを測定したところ，アラーミン分子を添加したほうが有意に下がっていた。またタイトジャンクション機能を評価するためにZO-1, occludin，アドヘレンスジャンクションを評価するのにE-cadherin, β-cateninの発現を免疫組織学的に検討したところ，これらの発現は抑制されていた。これらのことから，アラーミン分子はバリアー機能を落とす作用があることが示唆された。
ウサギ角膜炎モデルについての検討は現在進行中である。
|
