膠様滴状角膜ジストロフィにおけるタイトジャンクション構成機構の解明

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26861461
• Research Institution: Kyoto Prefectural University of Medicine
• Principal Investigator: 中司 美奈 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員講師 (70614022)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 膠様滴状角膜ジストロフィ / TACSTD2 / CLDN1 / CLDN7 / タイトジャンクション

Outline of Annual Research Achievements

膠様滴状角膜ジストロフィ(GDLD)は、TACSTD2（Tumor-associated calcium signal transducer 2）遺伝子の変異によって、角膜上皮バリア機能が破綻し、角膜上皮下、角膜実質に涙液中のアミロイドが沈着する疾患である。我々は、TACSTD2がCLDN（claudin）1およびCLDN 7と直接結合し、角膜上皮におけるタイトジャンクションの形成にとって必須の分子であることを示してきたが、TACSTD2とCLDNタンパクがどのような分子結合をしているのかは依然不明である。GDLDと同様の臨床像を示す疾患に二次性角膜アミロイドーシスがある。しかし、二次性角膜アミロイドーシスの角膜においては、TACSTD2やCLDN1、CLDN7のいずれも発現していることから、アミロイド沈着のメカニズムが、膠様滴状角膜ジストロフィと異なる可能性がある。
またGDLD患者から樹立した不死化角膜および結膜上皮細胞において、細胞境界にTJP1、occludinの発現を認め、上皮バリア機能は、正常角膜上皮細胞に比べて著明な低下を認めるものの、ゼロではなく低いバリア機能を持っていることが分かっている。この結果から、GDLD角膜では低いレベルでタイトジャンクションが形成されていることが示唆されており、GDLDと二次性角膜アミロイドーシスの臨床像の相違は、タイトジャンクションの形成状態によるものの可能性がある。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

TACSTD2とCLDNタンパクが直接結合しているのか、他の分子を介して結合しているのかを検討しているが、変異体作成に難航している。
また、タイトジャンクションの機能変化に関与する他分子についても検討中である。

Strategy for Future Research Activity

角膜上皮細胞において、タイトジャンクション関連タンパクを中心に関連遺伝子を網羅的に検討することで、膠様滴状角膜ジストロフィの病態解明に近づけるか検討していく予定である。

Causes of Carryover

実験計画、方法の見直しが必要であったため

Expenditure Plan for Carryover Budget

培養細胞維持に必要な消耗品、遺伝子導入試薬、抗体などの消耗品に大部分を使用する予定である