炎症性刺激における膵B細胞の自食作用の機能形態解析と遺伝子治療

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26861530
• Research Institution: Shumei University
• Principal Investigator: 寺前 洋生 秀明大学, 人文社会・教育科学系, 准教授 (90599028)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 膵B細胞 / Autophagy / 炎症

Outline of Annual Research Achievements

敗血症の重症病態は炎症性サイトカインの産生により全身性炎症を合併しやすいが，未だに有効な治療法の確立には至っていない。これまで，敗血症病態マウスの膵臓の内分泌細胞に細胞質融解を主体とする自食作用（オートファジー）が生じることを確認している。そこで，本研究では膵B細胞株min6を培養し，それらにLPS，TNF-α，IL-6を用いて炎症刺激を与え，自食作用の影響がmRNA，タンパク質，形態でどのように変化するかを検討した。コントロール群としては，炎症刺激を与えていないものを用いた。min6の培養は，炎症刺激後，一定時間をおいてサンプリングを行った。mRNAやタンパク質，組織学的検討のそれぞれに応じたサンプリングを行った後，オートファジーに関連する遺伝子群，タンパク質の発現を解析した。その結果からオートファジーに関連する遺伝子群ならびに，タンパク質の発現が増加していることを確認した。
また，本研究ではさらに，オートファジー誘導蛋白をノックダウンすることで，膵B細胞株min6が炎症刺激にどのように変化するかを評価することも目的としていた。しかし，研究期間内に詳細なデータ解析を完了するまでには至らなかった。そこで今後は，本研究課題に基づいた実験を継続して行う。ノックダウンに関しては，siRNAをリポゾーム法で導入することを計画している。オートファジー関連遺伝子をノックダウンし，その評価を継続して行い，それらの結果と共に本研究内容を論文にまとめていくこととする。