細胞接着装置の産生量減少による癌転移機構の解明と制御薬の検索・同定

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26861703
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 肥後 盛洋 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (60724383)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 発がん / がん遺伝子 / 浸潤・転移

Outline of Annual Research Achievements

Kallikreinファミリーの1つであるKallikrein-Related Peptidase 13（KLK13）は主な 細胞接着装置であるcadherin複合体およびdesmosomeの全構成因子の産生を制御し、主に前立腺などの腺組織に多く発現していることが知られている。本研究では、細胞接着装置異常に基づく癌転移機構の詳細を解析し、その制御薬を開発するために、口腔扁平上皮癌を用いてKLK13 にフォーカスを当てた。
平成26年度の実験によりKLK13過剰発現株（oeKLK13株）と oeKLK13株にshRNAをトランスフェクションしたsh/oeKLK13株を樹立したので、その細胞株をヌードマウスに移植し、転移能を評価した。sh/oeKLK13株移植群は、oeKLK13株移植群と比較し、転移増強傾向を示した。次に遺伝子パスウェイ解析ソフトを用い、候補薬剤を同定した。候補薬剤を作用させ、細胞接着関連遺伝子群であるcadherin複合体およびdesmosome構成因子（E-cadherin、α-catenin、β-catenin、junction plakoglobin、plakophilin4、desmocollin2、等）をreal time PCR法にて評価したところ、全ての遺伝子において、有意に発現増強が認められた。また候補薬剤を用いて、細胞浸潤能試験および細胞遊走試験を行ったところ、control群と比較し、浸潤能、遊走能の有意な増強を認めた。さらにヌードマウスへの移植癌に対する候補薬剤の転移抑制能を検討したところ、候補薬剤を投与することにより転移が抑制される傾向を認めた。以上より、本研究により、細胞接着因子を増強することによる癌細胞転移抑制薬の候補薬剤を同定することができた。今後、実際の臨床応用が可能な転移治療薬の開発研究を行う予定である。